BAP1 Plasmídeo duplo de Nickase (h): sc-400232-NIC
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- BAP1O plasmídeo de dupla Nickase (h) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase BAP1 (h) e o Plasmídeo Double Nickase BAP1 (h2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para BAP1. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:BAP1 Anticorpo (C-4): sc-28383
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
BAP1 Plasmídeo duplo de Nickase (h) | sc-400232-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
BAP1 Plasmídeo duplo de Nickase (h2) | sc-400232-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
A proteína 1 associada a BRCA1 (BAP1) codifica uma desubiquitinase nuclear que forma o complexo PR-DUB com proteínas ASXL para remover a monoubiquitina da histona H2A (H2AK119ub), modulando assim a acessibilidade da cromatina e a produção transcricional. A BAP1 participa da regulação epigenética, da sinalização de dano ao DNA, do controle do ciclo celular e de programas de diferenciação por meio de interações com vias associadas ao Polycomb e com outros reguladores transcricionais. A disfunção da BAP1 tem sido associada à manutenção genômica alterada, à expressão gênica aberrante e a mudanças nas decisões de destino celular. Na biologia das doenças humanas, a BAP1 é frequentemente estudada no contexto de redes supressoras de tumor e de vulnerabilidades específicas de linhagem, nas quais a desregulação epigenética e o comprometimento de vias de reparo contribuem para a patogênese.
BAP1 O Plasmídeo de Nickase Dupla (h) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus BAP1 em linhas celulares human. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de BAP1. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função BAP1. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com BAP1 interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.