ATP7B CRISPR/Cas9 케이오 플라스미드 (m): sc-419260

개요

마우스 Atp7b는 P형 ATPase 계열의 구리 수송체인 ATP7B를 암호화하며, 구리 부하에 반응해 trans-골지 네트워크와 소포성 구획 사이를 오가면서 세포 내 구리 분포를 조절한다. ATP7B는 분비 경로에서 구리 의존성 효소(쿠프로엔자임)의 성숙을 지원하고, 구리의 격리 및 배출을 매개함으로써 세포의 금속 항상성과 산화 스트레스 반응과 통합적으로 작동한다. ATP7B 의존적 구리 처리 과정이 교란되면 산화환원 균형, 단백질 수송, 미토콘드리아 기능이 흐트러지므로, Atp7b는 구리 대사와 관련 병태생리를 연구하는 데 핵심적인 노드로 여겨진다. 마우스에서 Atp7b는 유전적 구리 과부하 표현형을 모델링하고, 금속 항상성 이상과 연관된 간 및 신경학적 기전을 규명하는 데 널리 사용된다.

ATP7B CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (m)는 mouse 세포주에서 Atp7b 유전자의 표적 파괴를 위해 설계된 플라스미드 풀입니다. 각 플라스미드는 Atp7b 유전자 내의 서로 다른 부위를 표적으로 하는 고유한 단일 가이드 RNA(sgRNA)와 Streptococcus pyogenes Cas9 뉴클레아제를 함께 발현합니다. 또한 이 플라스미드들은 GFP를 암호화하여, 형광 현미경이나 유세포 분석기를 통해 성공적으로 형질전환된 세포를 형광으로 식별하고 농축할 수 있게 합니다.

다중 가이드 설계는 Cas9에 의한 이중 가닥 절단 형성 후 Atp7b의 개방 독서 틀(ORF)을 파괴하는 삽입 또는 결실(indel)이 발생할 가능성을 높입니다. CRISPR/Cas9 시스템에 의해 유발된 DNA 절단은 내인성 비동종 말단 결합(NHEJ) 경로를 통해 복구되며, 이는 종종 ATP7B 단백질 발현을 소멸시키는 프레임 시프트 돌연변이를 초래합니다.

이 CRISPR 녹아웃 시스템은 ATP7B 신호 전달 연구, 기능 유전체학 연구, 암 생물학 연구 및 인간 세포주에서의 치료 반응 평가를 위한 Atp7b 결핍 세포 모델을 효율적으로 생성할 수 있게 합니다.

주요 특징

• ATP7B 기능에 중요한 Atp7b 엑손을 표적하는 sgRNA
  전달을 단순화하기 위해 단일 플라스미드에서 SpCas9 및 sgRNA의 공동 발현
  형질전환된 세포 식별을 위한 GFP 리포터
  녹아웃 효율 향상을 위해 여러 Atp7b 게놈 부위를 표적하는 플라스미드 풀
  형질전환을 통한 전달과 호환

설계 변형

CRISPRs +/- HDR

• ATP7B CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (m) 및 ATP7B CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (m2)에 의해 암호화되는 gRNA는 Atp7b 유전자좌 내의 서로 다른 부위를 표적화합니다. 표적화 설계 중 하나 또는 둘 다 이용 가능할 수 있습니다. 구입 가능 여부는 관련 제품을 참조하십시오.
  ATP7B HDR 플라스미드 (m) 및 ATP7B HDR 플라스미드 (m2)에 의해 암호화되는
  HDR 기증자 컨스트럭트는 푸로마이신 내성 카세트와 RFP 리포터를 포함하며, 이는 CRISPR/Cas9 KO 설계에 해당하는 정의된 Atp7b 표적 부위에서의 상동성 유도 복구를 지원하기 위해 Atp7b 상동성 암으로 둘러싸여 있습니다. HDR 기증자의 재고 여부는 달라질 수 있습니다. 재고 여부는 관련 제품을 참조하십시오.

연구용으로만 사용하세요. 진단 또는 치료용이 아닙니다.