Plasmide Double Nickase (h) ATF-1/ATF1: sc-400488-NIC
- Espèces cibles: human
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- Le Plasmide Double Nickase (h) ATF-1/ATF1 correspond à une paire de plasmides chacun codant la nucléase Cas9 mutante D10A et un ARN guide (gARN) cible de 20 nt specifique, élaboré pour le knockout optimal de l'expression d'un gène avec une plus grande spécificité que le plasmide KO CRISPR/Cas9 correspondant.
- Les séquences des paires d'ARNg sont décalées de 20 pb environ pour induire avec la Cas9 une double entaille spécifique de l'ADN génomique, qui imite un DSB
- L'un des plasmides de la paire contient un gène de résistance à la puromycine; l'autre plasmide de la paire contient un marqueur GFP pour confirmer visuellement la transfection
- Le plasmide ATF-1/ATF1 Double Nickase (h) et le plasmide ATF-1/ATF1 Double Nickase (h2) codent pour des paires distinctes de gRNA ciblant ATF1. Un ou les deux modèles peuvent être disponibles
- Après transfection, l'efficacité de knockout de gène peut être évaluée par WB, IF ou IHC en utilisant l'anticorps: ATF-1/ATF1 Antibody (C41-5.1): sc-243
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide Double Nickase (h) ATF-1/ATF1 | sc-400488-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plasmide Double Nickase (h2) ATF-1/ATF1 | sc-400488-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
ATF1 code le facteur de transcription activateur 1 (ATF-1), un facteur de transcription bZIP de la famille CREB/ATF qui se lie aux éléments de réponse à l’AMPc (CRE) afin de réguler des programmes d’expression génique dépendants des stimuli. ATF-1 intègre des signaux issus des voies AMPc/PKA et MAPK et est modulé par phosphorylation, ce qui permet un contrôle de la transcription adapté au contexte, impliquée dans la croissance cellulaire, la survie et les réponses au stress. Par dimérisation avec des facteurs apparentés tels que CREB1 et des protéines de la famille JUN, ATF-1 contribue à des réponses transcriptionnelles immédiates (gènes précoces) qui façonnent les états métaboliques et prolifératifs. Le dérèglement de l’activité d’ATF1 et des réseaux transcriptionnels dépendants des CRE a été impliqué dans des programmes transcriptionnels oncogéniques et d’autres pathologies où une régulation anormale de gènes sensibles aux signaux est une caractéristique.
ATF-1/ATF1 Le plasmide double nickase (h) se compose d'une paire de plasmides appariés, conçus pour une édition hautement spécifique du locus ATF1 dans les lignées cellulaires human. Chaque plasmide exprime une nickase Cas9 D10A et un sgRNA distinct ciblant des brins d'ADN opposés au sein de ATF1. Lorsqu'elles sont dirigées vers des sites adjacents sur des brins d'ADN opposés, les deux nickases génèrent des cassures simple brin décalées qui, ensemble, produisent une cassure double brin décalée, nécessitant une activité coordonnée sur la cible de la part des deux guides. La cassure d'ADN qui en résulte est résolue par les voies de réparation cellulaires endogènes, le plus souvent par jonction non homologue (NHEJ), ce qui conduit à des insertions ou des délétions qui perturbent la fonction de ATF1. En nécessitant l'engagement de deux ARNsg au locus cible, l'approche par double nick améliore la spécificité de l'édition et offre une stratégie CRISPR complémentaire pour les applications où un contrôle supplémentaire de la précision du ciblage est souhaité.
Afin de faciliter l'identification efficace des cellules éditées, un plasmide code pour la GFP permettant la visualisation par fluorescence des populations transfectées, tandis que le plasmide compagnon porte un gène de résistance à la puromycine pour la sélection antibiotique. Ensemble, ces caractéristiques favorisent l'enrichissement efficace des populations co-transfectées et simplifient la validation des clones présentant une perturbation de ATF1.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.