ARK-2 Lentiviral Activation Particles (h): sc-402041-LAC

AURKB kodiert für Aurora-Kinase B (ARK-2), eine Serin/Threonin-Kinase, die als katalytischer Kern des Chromosomal-Passenger-Komplexes fungiert und die Chromosomenkondensation, die Kinetochor–Mikrotubuli-Anheftungen, die Spindelkontrollpunkt-Signalgebung sowie die Zytokinese koordiniert. Durch die Phosphorylierung von Substraten wie Histon H3 und zentralen Zentromer-/Kinetochor-Proteinen reguliert AURKB die Fehlerkorrektur während der Mitose und stellt eine korrekte Chromosomentrennung sicher. Eine fehlregulierte AURKB-Aktivität ist mit chromosomaler Instabilität, Aneuploidie und einer veränderten Kontrolle der Proliferation verbunden, wie sie in zahlreichen Tumorkontexten beobachtet werden, wodurch AURKB ein häufig genutzter Ansatzpunkt zur Untersuchung der Mitosekontrolle und der Genomstabilität ist. Die experimentelle Modulation von AURKB unterstützt Untersuchungen zu Zellzyklusübergängen, zur Dynamik des Spindelassemblierungs-Kontrollpunkts und zu Mechanismen der Toleranz gegenüber Replikationsstress.

ARK-2 Lentivirale Aktivierungspartikel (h) erfüllen diesen Bedarf, indem sie das vollständige Transkriptionsaktivierungssystem des Synergistic Activation Mediator (SAM) in transduktionsbereite, hoch-titrige lentivirale Partikel verpacken und so eine effiziente AURKB-Hochregulation über ein breiteres Spektrum menschlicher Zelltypen ermöglichen.

ARK-2 Lentivirale Aktivierungspartikel (h) liefern alle funktionellen Komponenten des Synergistic Activation Mediator (SAM)-Systems über lentivirale Transduktion. Das System umfasst drei Partikelpräparate, die gemeinsam in Zielzellen transduziert werden: eines, das für katalytisch inaktives dCas9 (Mutationen D10A und N863A) kodiert, das mit der VP64-Transaktivierungsdomäne und einem Blasticidin-Resistenzgen fusioniert ist; eines, das für das MS2-p65-HSF1-Fusionsprotein mit einem Hygromycin-Resistenzgen kodiert; und eines, das für eine zielspezifische 20-nt-sgRNA kodiert, die an zwei MS2-RNA-Aptamere mit einem Puromycin-Resistenzgen fusioniert ist. Nach der lentiviralen Transduktion und der genomischen Integration der Expressionskassetten werden die SAM-Komponenten stabil exprimiert und lagern sich am Zielort innerhalb der proximalen Promotorregion stromaufwärts der AURKB-Transkriptionsstartstelle an, wo VP64, p65 und HSF1 kooperativ wirken, um endogene Transkriptionsmaschinerie zu rekrutieren und eine anhaltende Hochregulation der endogenen ARK-2-Expression zu bewirken. Die Verwendung von nuklease-inaktivem dCas9 verhindert die Einführung von Doppelstrangbrüchen in der DNA und bewahrt den nativen AURKB-Genomlokus sowie die regulatorische Architektur.

Das lentivirale Format bietet mehrere praktische Vorteile: Die stabile genomische Integration unterstützt eine vererbbare Aktivierung über Zellteilungen hinweg; Partikelpräparate mit hohem Titer machen eine eigene Virusproduktion überflüssig; und die Kompatibilität mit primären, sich nicht teilenden und transfektionsresistenten Zelltypen erweitert die experimentellen Möglichkeiten. Eine erfolgreiche Transduktion kann durch eine dreifache Antibiotika-Selektion mit Puromycin, Hygromycin und Blasticidin bestätigt und verstärkt werden.

Nur für Forschungszwecke. Nicht für diagnostische oder therapeutische Zwecke bestimmt.