Plasmide Double Nickase (h) Aquaporin 9/AQP9: sc-401298-NIC
- Espèces cibles: human
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- Le Plasmide Double Nickase (h) Aquaporin 9/AQP9 correspond à une paire de plasmides chacun codant la nucléase Cas9 mutante D10A et un ARN guide (gARN) cible de 20 nt specifique, élaboré pour le knockout optimal de l'expression d'un gène avec une plus grande spécificité que le plasmide KO CRISPR/Cas9 correspondant.
- Les séquences des paires d'ARNg sont décalées de 20 pb environ pour induire avec la Cas9 une double entaille spécifique de l'ADN génomique, qui imite un DSB
- L'un des plasmides de la paire contient un gène de résistance à la puromycine; l'autre plasmide de la paire contient un marqueur GFP pour confirmer visuellement la transfection
- Le plasmide Aquaporin 9/AQP9 Double Nickase (h) et le plasmide Aquaporin 9/AQP9 Double Nickase (h2) codent pour des paires distinctes de gRNA ciblant AQP9. Un ou les deux modèles peuvent être disponibles
- Après transfection, l'efficacité de knockout de gène peut être évaluée par WB, IF ou IHC en utilisant l'anticorps: Aquaporin 9/AQP9 Antibody (G-3): sc-74409
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide Double Nickase (h) Aquaporin 9/AQP9 | sc-401298-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plasmide Double Nickase (h2) Aquaporin 9/AQP9 | sc-401298-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
AQP9 code l’aquaporine-9, un canal de la membrane plasmique qui facilite le flux transmembranaire d’eau et de petits solutés neutres, dont le glycérol et d’autres polyols, reliant ainsi l’équilibre osmotique au métabolisme intermédiaire. Dans les hépatocytes et les cellules immunitaires, AQP9 contribue à l’entrée du glycérol et à la gestion du carbone, ce qui peut influencer les processus de néoglucogenèse et de métabolisme lipidique, tout en participant à la régulation du volume cellulaire. Son expression est régulée par des signaux inflammatoires et métaboliques, reliant AQP9 à des voies qui gouvernent le transport des nutriments, les réponses au stress et les transitions d’état cellulaire. Des niveaux d’AQP9 dérégulés ont été rapportés dans des contextes de dysfonctionnement métabolique et de biologie des maladies inflammatoires, ce qui en fait une cible utile pour des études mécanistiques du transport membranaire et de la reprogrammation métabolique.
Aquaporin 9/AQP9 Le plasmide double nickase (h) se compose d'une paire de plasmides appariés, conçus pour une édition hautement spécifique du locus AQP9 dans les lignées cellulaires human. Chaque plasmide exprime une nickase Cas9 D10A et un sgRNA distinct ciblant des brins d'ADN opposés au sein de AQP9. Lorsqu'elles sont dirigées vers des sites adjacents sur des brins d'ADN opposés, les deux nickases génèrent des cassures simple brin décalées qui, ensemble, produisent une cassure double brin décalée, nécessitant une activité coordonnée sur la cible de la part des deux guides. La cassure d'ADN qui en résulte est résolue par les voies de réparation cellulaires endogènes, le plus souvent par jonction non homologue (NHEJ), ce qui conduit à des insertions ou des délétions qui perturbent la fonction de AQP9. En nécessitant l'engagement de deux ARNsg au locus cible, l'approche par double nick améliore la spécificité de l'édition et offre une stratégie CRISPR complémentaire pour les applications où un contrôle supplémentaire de la précision du ciblage est souhaité.
Afin de faciliter l'identification efficace des cellules éditées, un plasmide code pour la GFP permettant la visualisation par fluorescence des populations transfectées, tandis que le plasmide compagnon porte un gène de résistance à la puromycine pour la sélection antibiotique. Ensemble, ces caractéristiques favorisent l'enrichissement efficace des populations co-transfectées et simplifient la validation des clones présentant une perturbation de AQP9.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.