Não são dados CRISPR: a imagem ilustra a qualidade do anticorpo para visualizar os resultados da experiência CRISPR.
Não são dados CRISPR: a imagem ilustra a qualidade do anticorpo para visualizar os resultados da experiência CRISPR.
apoH Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m): sc-419168
- alvos específicos: mouse
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- apoH O Plasmídeo CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (m) é um conjunto de plasmídeos, cada um codificando a nuclease Cas9 e um RNA guia (gRNA) de 20 nt específico para o alvo, concebido para uma eficiência máxima de knockout utilizando sequências derivadas da biblioteca GeCKO v2
- As sequências de gRNA direcionam a Cas9 para induzir quebras de cadeia dupla (DSBs) específicas do local no locus genómico apoH, resultando no knockout do gene através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ)
- Os genes de resistência à puromicina e RFP são flanqueados por sítios LoxP, permitindo a remoção de marcadores de seleção através da recombinase Cre (Cre Vector: sc-418923) após o estabelecimento de linhas celulares knockout estáveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:apoH Anticorpo (C-2): sc-515677
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
apoH Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m) | sc-419168 | 20 µg | $397.00 |
Visão geral
Apoh codifica a apolipoproteína H (apoH; β2-glicoproteína I), uma glicoproteína circulante que se liga a fosfolipídios e se associa a membranas aniônicas e a partículas de lipoproteínas. Em camundongos, a apoH participa de processos de transporte e depuração de lipídios e faz interface com vias relacionadas à coagulação e ao complemento por meio de suas interações com fosfolipídios carregados negativamente expostos durante a ativação ou o dano celular. Alterações na biologia de APOH/apoH estão ligadas à desregulação da hemostasia e a processos vasculares inflamatórios, sendo frequentemente estudada no contexto do reconhecimento de fosfolipídios mediado por autoanticorpos. Essas funções tornam Apoh um alvo útil para investigar o crosstalk entre lipídios e imunidade, a biologia de proteínas de ligação a membranas e os mecanismos que conectam inflamação a fenótipos relacionados à trombose em modelos experimentais.
O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO apoH (m) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene Apoh em linhas celulares mouse. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do Apoh, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.
O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do Apoh na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína apoH.
Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de Apoh para a investigação da sinalização de apoH, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.
Características principais
- sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) Apoh críticos para a função apoH
Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
Repórter GFP para identificação de células transfectadas
Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos Apoh para melhorar a eficiência do knockout
Compatível com administração por transfecção
Variantes de Design
CRISPRs +/- HDRs
- Os gRNAs codificados pelo apoH Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m) e pelo apoH Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m2) têm como alvo locais distintos dentro do locus Apoh. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
As construções doadoras HDR codificadas pelo apoH Plasmídeo HDR (m) e o Plasmídeo HDR apoH (m2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia Apoh para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo Apoh definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.