Angptl4 Double Nickase Plasmid (h): sc-401369-NIC

ANGPTL4 (Angiopoietin-like 4) kodiert ein sezerniertes Glykoprotein, das den Lipid- und Energiestoffwechsel moduliert, indem es die Lipoproteinlipase hemmt und die Clearance triglyzeridreicher Lipoproteine verändert. Angptl4 wird auf transkriptioneller Ebene durch PPAR-Signalwege reguliert und verknüpft die Nährstoffverfügbarkeit mit metabolischer Anpassung; es beeinflusst die Lipolyse im Fettgewebe, den hepatischen Lipidstoffwechsel und die systemische Insulinsensitivität. Über den Stoffwechsel hinaus ist Angptl4 an der Umgestaltung von Endothel und extrazellulärer Matrix beteiligt und beeinflusst damit Gefäßpermeabilität, Entzündungsprozesse und Zell–Matrix-Interaktionen. Eine fehlregulierte ANGPTL4-Expression wurde mit kardiometabolischen Phänotypen, entzündlichen Zuständen und Programmen der Tumormikroumgebung, einschließlich hypoxie- und metastasebezogener Signalwege, in Verbindung gebracht und ist damit ein nützliches Ziel für mechanistische Untersuchungen.

Angptl4 Das Double-Nickase-Plasmid (h) besteht aus einem aufeinander abgestimmten Plasmidpaar, das für die hochspezifische Bearbeitung des ANGPTL4-Lokus in human-Zelllinien entwickelt wurde. Jedes Plasmid exprimiert eine Cas9-D10A-Nickase und eine spezifische sgRNA, die auf entgegengesetzte DNA-Stränge innerhalb von ANGPTL4 abzielt. Wenn sie auf benachbarte Stellen auf entgegengesetzten DNA-Strängen gerichtet sind, erzeugen die beiden Nickasen versetzte Einzelstrang-Schnitte, die zusammen einen versetzten Doppelstrangbruch erzeugen, was eine koordinierte On-Target-Aktivität beider Guides erfordert. Der resultierende DNA-Bruch wird durch endogene zelluläre Reparaturwege behoben, meist durch nicht-homologe Endverknüpfung (NHEJ), was zu Insertionen oder Deletionen führt, die die ANGPTL4-Funktion stören. Durch die Notwendigkeit einer doppelten sgRNA-Bindung am Zielort erhöht der Doppel-Nick-Ansatz die Spezifität der Bearbeitung und bietet eine komplementäre CRISPR-Strategie für Anwendungen, bei denen eine zusätzliche Kontrolle über die Zielgenauigkeit gewünscht ist.

Um eine effiziente Identifizierung editierter Zellen zu unterstützen, kodiert ein Plasmid GFP zur fluoreszierenden Visualisierung transfizierter Populationen, während das Begleitplasmid ein Puromycin-Resistenzgen für die Antibiotika-Selektion trägt. Zusammen unterstützen diese Merkmale eine effiziente Anreicherung co-transfizierter Populationen und vereinfachen die Validierung von Klonen mit ANGPTL4-Störung.

Nur für Forschungszwecke. Nicht für diagnostische oder therapeutische Zwecke bestimmt.