Aldehyde dehydrogenase 3-A2/ALDH3A2 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h): sc-405313

Visão geral

A ALDH3A2 humana (desidrogenase de aldeídos graxos, FALDH) é uma enzima dependente de NAD que oxida aldeídos alifáticos de cadeia média e longa aos seus correspondentes ácidos graxos, limitando o acúmulo de aldeídos lipídicos reativos gerados durante o metabolismo de lipídios e o estresse oxidativo. É um componente-chave do catabolismo de álcoois graxos e esfingolipídios, incluindo a degradação de aldeídos graxos derivados do turnover de plasmalogênios e lipídios éter. Ao controlar a carga de aldeídos, a ALDH3A2 contribui para a homeostase lipídica de membrana e o equilíbrio redox celular. Variantes com perda de função estão associadas à síndrome de Sjögren–Larsson e são estudadas no contexto de patologia neurocutânea e toxicidade celular mediada por lipídios.

O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO Aldehyde dehydrogenase 3-A2/ALDH3A2 (h) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene ALDH3A2 em linhas celulares human. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do ALDH3A2, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.

O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do ALDH3A2 na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína Aldehyde dehydrogenase 3-A2/ALDH3A2.

Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de ALDH3A2 para a investigação da sinalização de Aldehyde dehydrogenase 3-A2/ALDH3A2, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.

Características principais

• sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) ALDH3A2 críticos para a função Aldehyde dehydrogenase 3-A2/ALDH3A2
  Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
  Repórter GFP para identificação de células transfectadas
  Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos ALDH3A2 para melhorar a eficiência do knockout
  Compatível com administração por transfecção

Variantes de Design

CRISPRs +/- HDRs

• Os gRNAs codificados pelo Aldehyde dehydrogenase 3-A2/ALDH3A2 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) e pelo Aldehyde dehydrogenase 3-A2/ALDH3A2 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h2) têm como alvo locais distintos dentro do locus ALDH3A2. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
  As construções doadoras HDR codificadas pelo Aldehyde dehydrogenase 3-A2/ALDH3A2 Plasmídeo HDR (h) e o Plasmídeo HDR Aldehyde dehydrogenase 3-A2/ALDH3A2 (h2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia ALDH3A2 para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo ALDH3A2 definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.

Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.