Aiolos CRISPR/Cas9 KOプラスミド (h): sc-400764

概要

IKZF3は、リンパ球の分化と免疫恒常性を、系統特異的な遺伝子発現プログラムの制御を通じて調節するIkarosファミリーの亜鉛フィンガー型転写因子であるAiolosをコードします。Aiolosは、抗原受容体経路の下流シグナルを統合しながら、B細胞の成熟、形質細胞の発生、T細胞の機能状態を規定するクロマチンアクセシビリティや転写抑制／活性化ネットワークを調節します。IKZF3活性の変化は、免疫応答の制御不全やリンパ系細胞の運命決定の攪乱と関連づけられており、自己免疫、炎症、造血器腫瘍の生物学に関する研究において重要です。ヒト細胞では、Aiolos依存的な転写回路がサイトカインシグナルの出力や、活性化と分化プログラムの切り替えのチェック機構に影響を与えます。

Aiolos CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h）は、human細胞株におけるIKZF3遺伝子の標的破壊を目的として設計されたプラスミドのプールである。各プラスミドは、IKZF3内の異なる部位を標的とする固有のシングルガイドRNA（sgRNA）と、Streptococcus pyogenes由来のCas9ヌクレアーゼを共発現します。また、これらのプラスミドはGFPをコードしており、蛍光顕微鏡やフローサイトメトリーを用いて、トランスフェクションに成功した細胞を蛍光で識別・濃縮することが可能です。

このマルチガイド設計により、Cas9による二本鎖切断の形成後に、IKZF3のオープンリーディングフレームを破壊する挿入または欠失（インデル）が生じる可能性が高まります。CRISPR/Cas9システムによって導入されたDNA切断は、内因性の非相同末端結合（NHEJ）経路を通じて修復され、その結果、Aiolosタンパク質の発現を阻害するフレームシフト変異が生じることが頻繁にあります。

このCRISPRノックアウトシステムにより、Aiolosシグナル伝達、機能ゲノミクス研究、がん生物学研究、およびヒト細胞株における治療反応の評価を目的とした、IKZF3欠損細胞モデルの効率的な作製が可能となる。

主な特徴

• Aiolosの機能に不可欠なIKZF3エクソンを標的とするsgRNA
  導入を簡素化するための、単一プラスミドからのSpCas9およびsgRNAの共発現
  トランスフェクトされた細胞を識別するためのGFPレポーター
  ノックアウト効率を向上させるための、IKZF3ゲノム上の複数の部位を標的とするプラスミドのプール
  トランスフェクションによる導入に対応

設計バリエーション

CRISPRs +/- HDR

• Aiolos CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h）およびAiolos CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h2）によってコードされるgRNAは、IKZF3遺伝子座内の異なる部位を標的としています。いずれか一方、または両方の標的設計が利用可能な場合があります。入手可能性については「関連製品」を参照してください。
  Aiolos HDRプラスミド（h）および Aiolos HDRプラスミド（h2）によってコードされるHDRドナー構築体は、プロマイシン耐性カセットとRFPレポーターを含み、これらはIKZF3ホモロジーアームに挟まれており、CRISPR/Cas9 KO設計に対応する特定のIKZF3標的部位でのホモロジー依存修復をサポートします。HDRドナーの入手可能性は異なる場合があります。入手可能性については「関連製品」をご確認ください。

研究用のみ。診断用または治療用ではありません。