Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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Ah Receptor Double Nickase Plasmid (m): sc-419054-NIC
- Zielspezies: mouse
- 20 µg transfektionsfertige, aufgereinigte Plasmid DNA; geeignet für 20 Transfektionen
- Das Ah Receptor Double Nickase Plasmid (m) wird als Plasmid-Paar geliefert. Die einzelnen Plasmide kodieren für eine D10A mutierte Cas9 Nuklease sowie für je eine unterschiedliche, zielspezifische 20nt guide RNA (gRNA) Sequenz. Dies erlaubt eine hohe Knockout-Effizienz bei gleichzeitig größerer Spezifität als das entsprechende CRISPR/Cas9 KO Plasmid
- gRNA Sequenzpaare liegen ca. 20 bp auseinander um ein spezifisches Cas9-vermitteltes "Double Nicking" der genomischen DNA zu erlauben und so im Resultat den Effekt eines Doppelstrangbruchs nachzuahmen.
- Ein Plasmid kodiert für ein Puromycin-Resistenzgen zur Selektion von stabilen Knockout-Zellen. Das andere Plasmid kodiert für ein GFP-Gen für den visuellen Nachweis der Transfektion
- Ah Receptor Double-Nickase-Plasmid (m) und Ah Receptor Double-Nickase-Plasmid (m2) kodieren unterschiedliche gepaarte gRNA-Designs, die auf Ahr abzielen. Möglicherweise ist eines oder sind beide Designs verfügbar
- Nach der Transfektion kann die Effizienz des Gen-Knockouts per Western Blot oder histologisch mit folgendem Antikörper überprüft werden: Ah Receptor: sc-133088
Bestellinformation
| Produkt | Katalog # | EINHEIT | Preis | ANZAHL | Favoriten | |
Ah Receptor Double Nickase Plasmid (m) | sc-419054-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Ah Receptor Double Nickase Plasmid (m2) | sc-419054-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
Das Mausgen **Ahr** kodiert den Aryl-Hydrocarbon-Rezeptor (AhR), einen ligandenaktivierten Transkriptionsfaktor, der Xenobiotika und endogene Metaboliten erkennt, um Genexpressionsprogramme in Entgiftungs- und Barrieregeweben zu regulieren. Nach Aktivierung transloziert AhR in den Zellkern, dimerisiert mit ARNT und bindet an Xenobiotic-Response-Elemente, um Zielgene wie Cytochrom-P450-Enzyme zu induzieren; dabei integriert er Crosstalk mit NF-κB, Wnt/β-Catenin und weiteren entzündlichen sowie metabolischen Signalwegen. Die AhR-Signalkaskade moduliert die Homöostase von Epithelien, die Funktion antigenpräsentierender Zellen und die Differenzierung von T-Zellen und prägt so die mukosale Immunität und Reaktionen auf Umweltreize. Eine fehlregulierte Ahr-Aktivität wird mit einer erhöhten Empfindlichkeit gegenüber Toxinen, entzündlichen Phänotypen und Tumorbiologie in Verbindung gebracht, weshalb sie als zentraler Ansatzpunkt für mechanistische Studien zu Gen-Umwelt-Interaktionen широко genutzt wird.
Ah Receptor Das Double-Nickase-Plasmid (m) besteht aus einem aufeinander abgestimmten Plasmidpaar, das für die hochspezifische Bearbeitung des Ahr-Lokus in mouse-Zelllinien entwickelt wurde. Jedes Plasmid exprimiert eine Cas9-D10A-Nickase und eine spezifische sgRNA, die auf entgegengesetzte DNA-Stränge innerhalb von Ahr abzielt. Wenn sie auf benachbarte Stellen auf entgegengesetzten DNA-Strängen gerichtet sind, erzeugen die beiden Nickasen versetzte Einzelstrang-Schnitte, die zusammen einen versetzten Doppelstrangbruch erzeugen, was eine koordinierte On-Target-Aktivität beider Guides erfordert. Der resultierende DNA-Bruch wird durch endogene zelluläre Reparaturwege behoben, meist durch nicht-homologe Endverknüpfung (NHEJ), was zu Insertionen oder Deletionen führt, die die Ahr-Funktion stören. Durch die Notwendigkeit einer doppelten sgRNA-Bindung am Zielort erhöht der Doppel-Nick-Ansatz die Spezifität der Bearbeitung und bietet eine komplementäre CRISPR-Strategie für Anwendungen, bei denen eine zusätzliche Kontrolle über die Zielgenauigkeit gewünscht ist.
Um eine effiziente Identifizierung editierter Zellen zu unterstützen, kodiert ein Plasmid GFP zur fluoreszierenden Visualisierung transfizierter Populationen, während das Begleitplasmid ein Puromycin-Resistenzgen für die Antibiotika-Selektion trägt. Zusammen unterstützen diese Merkmale eine effiziente Anreicherung co-transfizierter Populationen und vereinfachen die Validierung von Klonen mit Ahr-Störung.
Nur für Forschungszwecke. Nicht für diagnostische oder therapeutische Zwecke bestimmt.