AGTRAP Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m): sc-419051

Visão geral

Agtrap codifica a proteína associada ao receptor de angiotensina II (AGTRAP), um regulador associado à membrana que se liga ao AGTR1 e influencia o tráfego do receptor, a internalização e a dinâmica da sinalização a jusante. Ao modular vias dependentes de angiotensina II, a AGTRAP pode impactar a sinalização MAPK/ERK, as respostas ao estresse celular e programas transcricionais inflamatórios, o que a relaciona à homeostase tecidual nos sistemas cardiovascular e renal. Em modelos murinos, a alteração da atividade de Agtrap tem sido utilizada para investigar mecanismos subjacentes à regulação da pressão arterial, ao remodelamento vascular e à função renal. Essas propriedades fazem da AGTRAP um nó útil para estudar a regulação de GPCRs e a sinalização do sistema renina–angiotensina em tipos celulares fisiologicamente relevantes.

O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO AGTRAP (m) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene Agtrap em linhas celulares mouse. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do Agtrap, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.

O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do Agtrap na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína AGTRAP.

Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de Agtrap para a investigação da sinalização de AGTRAP, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.

Características principais

• sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) Agtrap críticos para a função AGTRAP
  Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
  Repórter GFP para identificação de células transfectadas
  Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos Agtrap para melhorar a eficiência do knockout
  Compatível com administração por transfecção

Variantes de Design

CRISPRs +/- HDRs

• Os gRNAs codificados pelo AGTRAP Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m) e pelo AGTRAP Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m2) têm como alvo locais distintos dentro do locus Agtrap. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
  As construções doadoras HDR codificadas pelo AGTRAP Plasmídeo HDR (m) e o Plasmídeo HDR AGTRAP (m2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia Agtrap para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo Agtrap definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.

Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.