ACRV1 Plásmido CRISPR/Cas9 KO (m): sc-418963

Descripción general

Acrv1 codifica la proteína 1 de la vesícula acrosómica (ACRV1), un componente del acrosoma del espermatozoide enriquecido en el testículo que contribuye a la biogénesis del acrosoma y a la arquitectura molecular necesaria para la fecundación. En espermátidas de ratón, ACRV1 respalda procesos tardíos de la espermiogénesis, incluida la formación del acrosoma, el moldeado de la cabeza del espermatozoide y eventos de maduración que influyen en las interacciones con la zona pelúcida y en la reacción acrosómica. La desregulación de proteínas acrosómicas se asocia con una menor función espermática y fenotipos de subfertilidad masculina, lo que convierte a Acrv1 en un punto de entrada genético útil para estudiar la biología reproductiva. Este gen se utiliza con frecuencia para analizar programas de diferenciación de células germinales y vías relacionadas con el acrosoma que sustentan la calidad espermática y la capacidad de fecundación.

El plásmido CRISPR/Cas9 KO ACRV1 (m) es un conjunto de plásmidos diseñado para la interrupción dirigida del gen Acrv1 en líneas celulares mouse. Cada plásmido coexpresa un ARN guía único (sgRNA) dirigido a un sitio distinto dentro del Acrv1 junto con la nucleasa Cas9 de Streptococcus pyogenes. Los plásmidos también codifican GFP, lo que permite la identificación fluorescente y el enriquecimiento de las células transfectadas con éxito mediante microscopía de fluorescencia o citometría de flujo.

El diseño multiguía aumenta la probabilidad de generar inserciones o deleciones (indeles) que interrumpan el marco de lectura abierto de Acrv1 tras la formación de roturas de doble cadena mediadas por Cas9. Las roturas de ADN introducidas por el sistema CRISPR/Cas9 se reparan a través de vías endógenas de unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que con frecuencia da lugar a mutaciones de desplazamiento del marco de lectura que anulan la expresión de la proteína ACRV1.

Este sistema de knockout CRISPR permite la generación eficiente de modelos celulares deficientes en Acrv1 para la investigación de la señalización de ACRV1, estudios de genómica funcional, investigación en biología del cáncer y evaluación de respuestas terapéuticas en líneas celulares humanas.

Características principales

• sgRNA dirigidos a los exones de Acrv1 críticos para la función de ACRV1
  Coexpresión de SpCas9 y sgRNA a partir de un único plásmido para simplificar la administración
  Reportero GFP para la identificación de células transfectadas
  Conjunto de plásmidos dirigidos a múltiples sitios genómicos de Acrv1 para mejorar la eficiencia del knockout
  Compatible con la administración mediante transfección

Variantes de diseño

CRISPRs +/- HDRs

• Los gRNA codificados por el plásmido ACRV1 CRISPR/Cas9 KO (m) y el plásmido ACRV1 CRISPR/Cas9 KO (m2) se dirigen a sitios distintos dentro del locus Acrv1. Puede estar disponible uno o ambos diseños de orientación. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
  Las construcciones donantes HDR codificadas por el plásmido HDR ACRV1 (m) y el plásmido HDR ACRV1 (m2) contienen un casete de resistencia a la puromicina y un reportero RFP flanqueado por brazos de homología Acrv1 para facilitar la reparación dirigida por homología en sitios diana Acrv1 definidos que se corresponden con los diseños de KO de CRISPR/Cas9. La disponibilidad de los donantes HDR puede variar. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.

Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.