ACRV1 CRISPR/Cas9 KOプラスミド (m): sc-418963

概要

Acrv1 は、先体小胞タンパク質1（ACRV1）をコードする遺伝子であり、精巣で高発現する精子先体の構成要素として、先体の形成（生合成）および受精に必要な分子構築に寄与します。マウスの精子細胞（spermatid）では、ACRV1 は先体形成、精子頭部の形態形成、ならびに透明帯との相互作用や先体反応に影響する成熟過程など、精子形成後期のプロセスを支えます。先体タンパク質の発現・機能異常は精子機能の低下や雄性の生殖能低下（subfertility）表現型と関連するため、Acrv1 は生殖生物学を研究するうえで有用な遺伝学的な入口となります。この遺伝子は、精細胞の分化プログラムや、精子の品質および受精能を規定する先体関連経路を解明する目的で、しばしば活用されます。

ACRV1 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（m）は、mouse細胞株におけるAcrv1遺伝子の標的破壊を目的として設計されたプラスミドのプールである。各プラスミドは、Acrv1内の異なる部位を標的とする固有のシングルガイドRNA（sgRNA）と、Streptococcus pyogenes由来のCas9ヌクレアーゼを共発現します。また、これらのプラスミドはGFPをコードしており、蛍光顕微鏡やフローサイトメトリーを用いて、トランスフェクションに成功した細胞を蛍光で識別・濃縮することが可能です。

このマルチガイド設計により、Cas9による二本鎖切断の形成後に、Acrv1のオープンリーディングフレームを破壊する挿入または欠失（インデル）が生じる可能性が高まります。CRISPR/Cas9システムによって導入されたDNA切断は、内因性の非相同末端結合（NHEJ）経路を通じて修復され、その結果、ACRV1タンパク質の発現を阻害するフレームシフト変異が生じることが頻繁にあります。

このCRISPRノックアウトシステムにより、ACRV1シグナル伝達、機能ゲノミクス研究、がん生物学研究、およびヒト細胞株における治療反応の評価を目的とした、Acrv1欠損細胞モデルの効率的な作製が可能となる。

主な特徴

• ACRV1の機能に不可欠なAcrv1エクソンを標的とするsgRNA
  導入を簡素化するための、単一プラスミドからのSpCas9およびsgRNAの共発現
  トランスフェクトされた細胞を識別するためのGFPレポーター
  ノックアウト効率を向上させるための、Acrv1ゲノム上の複数の部位を標的とするプラスミドのプール
  トランスフェクションによる導入に対応

設計バリエーション

CRISPRs +/- HDR

• ACRV1 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（m）およびACRV1 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（m2）によってコードされるgRNAは、Acrv1遺伝子座内の異なる部位を標的としています。いずれか一方、または両方の標的設計が利用可能な場合があります。入手可能性については「関連製品」を参照してください。
  ACRV1 HDRプラスミド（m）および ACRV1 HDRプラスミド（m2）によってコードされるHDRドナー構築体は、プロマイシン耐性カセットとRFPレポーターを含み、これらはAcrv1ホモロジーアームに挟まれており、CRISPR/Cas9 KO設計に対応する特定のAcrv1標的部位でのホモロジー依存修復をサポートします。HDRドナーの入手可能性は異なる場合があります。入手可能性については「関連製品」をご確認ください。

研究用のみ。診断用または治療用ではありません。