非 CRISPR 数据：图片说明了可视化 CRISPR 实验结果的抗体质量。
ACCα (D-5): sc-137104. DU 145 (A) 和 Jurkat (B) 全细胞裂解液中 ACCα 表达的 Western 印迹分析.
非 CRISPR 数据：图片说明了可视化 CRISPR 实验结果的抗体质量。
非 CRISPR 数据：图片说明了可视化 CRISPR 实验结果的抗体质量。
ACCα双切口酶质粒(h): sc-401102-NIC
- 针对种属：human
- 20 µg 纯化的即用型的质粒DNA，最多可供20次转染
- ACCα 双切口酶质粒（h）含有一对质粒，分别编码D10A突变的Cas9核酸酶，和目标特异的 20 nt 向导RNA （gRNA），与其相应的/%base_sku_name%/ CRISPR/Cas9敲除质粒相比，它在基因敲除方面具有更好的特异性
- 成对的向导RNA序列与目标基因中约20个碱基对互补，从而使Cas9可以模仿DNA双链断裂（DSB），介导特异的基因组DNA双切割
- 质粒对中的一个包含供筛选使用的嘌呤霉素抗性基因；另一个包含供观察转染使用的绿色荧光蛋白标记
- ACCα双切酶质粒（h）和ACCα双切酶质粒（h2）编码针对ACACA的不同配对gRNA设计。其中一种或两种设计可能均有提供
- 转染后，基因敲除效率可以用抗体：ACCα: sc-137104，通过WB, IF或者IHC分析
订购信息
| 产品名称 | 产品编号 | 规格 | 价格 | 数量 | 收藏夹 | |
ACCα双切口酶质粒(h) | sc-401102-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
ACCα双切口酶质粒(h2) | sc-401102-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
ACACA 编码乙酰辅酶A羧化酶α（ACCα）。ACCα 是一种依赖生物素的酶，催化乙酰‑CoA 在 ATP 依赖条件下转化为丙二酰‑CoA，这是从头脂肪酸合成中不可逆、决定性的关键步骤。通过调控丙二酰‑CoA 水平，ACCα 协调脂质合成代谢通量，并通过抑制 CPT1 间接调控线粒体脂肪酸 β‑氧化，从而将营养状态与能量稳态联系起来。ACCα 的活性与 AMPK 信号以及对脂质敏感的转录程序相整合，进而影响膜生物发生、脂滴形成以及乙酰‑CoA 的分配。ACACA 表达或活性失调与多种代谢性疾病表型相关，也与癌细胞代谢中对脂质依赖的脆弱性有关，因此常被用于研究代谢重编程与脂质生成（lipogenesis）。
ACCα 双切酶质粒（h）由一对匹配的质粒组成，专为在 human 细胞系中对 ACACA 位点进行高特异性编辑而设计。每个质粒分别表达Cas9 D10A切口酶和针对ACACA内不同DNA链的独特sgRNA。当这两种切口酶被引导至相邻但位于DNA链相反侧的位点时，会产生错位的单链切口，从而共同形成错位双链断裂，这需要两个引导RNA在靶位点上协同发挥作用。由此产生的DNA断裂通过内源性细胞修复途径（最常见的是非同源末端连接（NHEJ））得到修复，从而导致插入或缺失，进而破坏ACACA的功能。通过要求双sgRNA在靶位点结合，双切口方法提高了编辑特异性，并为需要对靶向精度进行额外控制的应用提供了互补的CRISPR策略。
为高效识别编辑后的细胞，其中一个质粒编码GFP以实现转染细胞群的荧光可视化，而配套质粒则携带嘌呤霉素抗性基因用于抗生素筛选。这些特性共同支持共转染细胞群的高效富集，并简化了ACACA基因失活克隆的验证流程。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。