Plasmide Double Nickase (h) ABHD6: sc-405114-NIC
- Espèces cibles: human
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- Le Plasmide Double Nickase (h) ABHD6 correspond à une paire de plasmides chacun codant la nucléase Cas9 mutante D10A et un ARN guide (gARN) cible de 20 nt specifique, élaboré pour le knockout optimal de l'expression d'un gène avec une plus grande spécificité que le plasmide KO CRISPR/Cas9 correspondant.
- Les séquences des paires d'ARNg sont décalées de 20 pb environ pour induire avec la Cas9 une double entaille spécifique de l'ADN génomique, qui imite un DSB
- L'un des plasmides de la paire contient un gène de résistance à la puromycine; l'autre plasmide de la paire contient un marqueur GFP pour confirmer visuellement la transfection
- Le plasmide ABHD6 Double Nickase (h) et le plasmide ABHD6 Double Nickase (h2) codent pour des paires distinctes de gRNA ciblant ABHD6. Un ou les deux modèles peuvent être disponibles
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide Double Nickase (h) ABHD6 | sc-405114-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plasmide Double Nickase (h2) ABHD6 | sc-405114-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
ABHD6 (domaine abhydrolase contenant 6) est une hydrolase à sérine qui régule la signalisation lipidique en hydrolysant l’endocannabinoïde 2‑arachidonoylglycérol ainsi que des monoacylglycérols apparentés, modulant ainsi les pools cellulaires de dérivés de l’acide arachidonique et les réponses eicosanoïdes en aval. En contrôlant le métabolisme des glycérolipides et des endocannabinoïdes, ABHD6 influence le remodelage des lipides membranaires, l’homéostasie métabolique et les voies de transduction du signal liées à l’inflammation et aux processus neuromodulateurs. Des altérations de l’activité d’ABHD6 ont été étudiées dans des contextes de dérégulation métabolique, de neuroinflammation et de reprogrammation lipidique associée aux tumeurs, où la signalisation lipidique peut affecter la prolifération, la migration et les interactions immunitaires. Ces caractéristiques font d’ABHD6 une cible utile pour disséquer des phénotypes pilotés par les lipides à l’aide de modèles de perturbation génétique dans des cellules humaines.
ABHD6 Le plasmide double nickase (h) se compose d'une paire de plasmides appariés, conçus pour une édition hautement spécifique du locus ABHD6 dans les lignées cellulaires human. Chaque plasmide exprime une nickase Cas9 D10A et un sgRNA distinct ciblant des brins d'ADN opposés au sein de ABHD6. Lorsqu'elles sont dirigées vers des sites adjacents sur des brins d'ADN opposés, les deux nickases génèrent des cassures simple brin décalées qui, ensemble, produisent une cassure double brin décalée, nécessitant une activité coordonnée sur la cible de la part des deux guides. La cassure d'ADN qui en résulte est résolue par les voies de réparation cellulaires endogènes, le plus souvent par jonction non homologue (NHEJ), ce qui conduit à des insertions ou des délétions qui perturbent la fonction de ABHD6. En nécessitant l'engagement de deux ARNsg au locus cible, l'approche par double nick améliore la spécificité de l'édition et offre une stratégie CRISPR complémentaire pour les applications où un contrôle supplémentaire de la précision du ciblage est souhaité.
Afin de faciliter l'identification efficace des cellules éditées, un plasmide code pour la GFP permettant la visualisation par fluorescence des populations transfectées, tandis que le plasmide compagnon porte un gène de résistance à la puromycine pour la sélection antibiotique. Ensemble, ces caractéristiques favorisent l'enrichissement efficace des populations co-transfectées et simplifient la validation des clones présentant une perturbation de ABHD6.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.