Plásmido Doble Nickase (h) 17β-HSD: sc-402072-NIC

El gen humano **HSD17B1** codifica la **17β-HSD** (17β-hidroxiesteroide deshidrogenasa tipo 1), una oxidorreductasa clave que cataliza la conversión de **estrona** en el estrógeno más potente **estradiol** y contribuye a la homeostasis local de las hormonas esteroideas. Al regular el equilibrio entre estrógenos y andrógenos, la 17β-HSD se integra en vías de señalización esteroidogénicas y endocrinas que influyen en programas transcripcionales que controlan la proliferación, la diferenciación y el metabolismo celular. Las alteraciones en la actividad o la expresión de **HSD17B1** se han asociado con fisiopatología dependiente de hormonas y con una señalización estrogénica desregulada en múltiples tejidos. En consecuencia, **HSD17B1** se estudia ampliamente en modelos de metabolismo de esteroides, regulación génica impulsada por receptores y mecanismos de enfermedad relacionados con el sistema endocrino.

17β-HSD El plásmido de doble nicasa (h) consiste en un par de plásmidos emparejados diseñados para la edición de alta especificidad del locus HSD17B1 en líneas celulares human. Cada plásmido expresa una nicasa Cas9 D10A y un ARN guía específico (sgRNA) dirigido a cadenas de ADN opuestas dentro de HSD17B1. Cuando se dirigen a sitios adyacentes en cadenas de ADN opuestas, las dos nicasas generan cortes en cadena simple desplazados que, juntos, producen una rotura de doble cadena escalonada, lo que requiere una actividad coordinada sobre el objetivo por parte de ambas guías. La rotura de ADN resultante se resuelve mediante vías de reparación celular endógenas, más comúnmente a través de la unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que da lugar a inserciones o deleciones que alteran la función de HSD17B1. Al requerir la participación de dos ARN guía en el locus diana, el enfoque de doble corte mejora la especificidad de la edición y proporciona una estrategia CRISPR complementaria para aplicaciones en las que se desea un control adicional sobre la precisión de la orientación.

Para facilitar la identificación eficiente de las células editadas, un plásmido codifica GFP para la visualización fluorescente de las poblaciones transfectadas, mientras que el plásmido complementario lleva un gen de resistencia a la puromicina para la selección con antibióticos. En conjunto, estas características facilitan el enriquecimiento eficiente de las poblaciones cotransfectadas y simplifican la validación de los clones con HSD17B1 alterado.

Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.