WDR22 CRISPR/Cas9 케이오 플라스미드 (m): sc-435826

개요

Dcaf5는 WD 반복을 포함하는 단백질인 WDR22를 암호화하며, WDR22는 DDB1–CUL4 E3 유비퀴틴 리가아제 생물학에 관여하는 것으로 알려져 있습니다. 이때 WD 반복 어댑터는 유비퀴틴 의존적 단백질 항상성(proteostasis)에서 기질 특이성을 부여하는 데 도움을 줍니다. 이러한 복합체를 통해 WDR22는 세포주기 진행, DNA 복제/수리와 연관된 품질 관리, 스트레스 반응성 신호전달을 조율하는 조절된 단백질 분해(턴오버)에 영향을 미칠 수 있는 위치에 있습니다. 유비퀴틴화 동역학의 변화는 유전체 불안정성과 비정상적 증식 메커니즘 전반과 밀접하게 관련되므로, Dcaf5/WDR22는 모델 시스템에서 종양성 전환 및 기타 증식성 질환과 연관된 경로를 연구하는 데 유용한 출발점이 됩니다. 마우스에서는 Dcaf5에 대한 유전적 교란을 통해 DCAF 연관 유비퀴틴 리가아제 네트워크의 조직 특이적·상황 의존적 역할을 규명하는 데 도움을 받을 수 있습니다.

WDR22 CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (m)는 mouse 세포주에서 Dcaf5 유전자의 표적 파괴를 위해 설계된 플라스미드 풀입니다. 각 플라스미드는 Dcaf5 유전자 내의 서로 다른 부위를 표적으로 하는 고유한 단일 가이드 RNA(sgRNA)와 Streptococcus pyogenes Cas9 뉴클레아제를 함께 발현합니다. 또한 이 플라스미드들은 GFP를 암호화하여, 형광 현미경이나 유세포 분석기를 통해 성공적으로 형질전환된 세포를 형광으로 식별하고 농축할 수 있게 합니다.

다중 가이드 설계는 Cas9에 의한 이중 가닥 절단 형성 후 Dcaf5의 개방 독서 틀(ORF)을 파괴하는 삽입 또는 결실(indel)이 발생할 가능성을 높입니다. CRISPR/Cas9 시스템에 의해 유발된 DNA 절단은 내인성 비동종 말단 결합(NHEJ) 경로를 통해 복구되며, 이는 종종 WDR22 단백질 발현을 소멸시키는 프레임 시프트 돌연변이를 초래합니다.

이 CRISPR 녹아웃 시스템은 WDR22 신호 전달 연구, 기능 유전체학 연구, 암 생물학 연구 및 인간 세포주에서의 치료 반응 평가를 위한 Dcaf5 결핍 세포 모델을 효율적으로 생성할 수 있게 합니다.

주요 특징

• WDR22 기능에 중요한 Dcaf5 엑손을 표적하는 sgRNA
  전달을 단순화하기 위해 단일 플라스미드에서 SpCas9 및 sgRNA의 공동 발현
  형질전환된 세포 식별을 위한 GFP 리포터
  녹아웃 효율 향상을 위해 여러 Dcaf5 게놈 부위를 표적하는 플라스미드 풀
  형질전환을 통한 전달과 호환

설계 변형

CRISPRs +/- HDR

• WDR22 CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (m) 및 WDR22 CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (m2)에 의해 암호화되는 gRNA는 Dcaf5 유전자좌 내의 서로 다른 부위를 표적화합니다. 표적화 설계 중 하나 또는 둘 다 이용 가능할 수 있습니다. 구입 가능 여부는 관련 제품을 참조하십시오.
  WDR22 HDR 플라스미드 (m) 및 WDR22 HDR 플라스미드 (m2)에 의해 암호화되는
  HDR 기증자 컨스트럭트는 푸로마이신 내성 카세트와 RFP 리포터를 포함하며, 이는 CRISPR/Cas9 KO 설계에 해당하는 정의된 Dcaf5 표적 부위에서의 상동성 유도 복구를 지원하기 위해 Dcaf5 상동성 암으로 둘러싸여 있습니다. HDR 기증자의 재고 여부는 달라질 수 있습니다. 재고 여부는 관련 제품을 참조하십시오.

연구용으로만 사용하세요. 진단 또는 치료용이 아닙니다.