USP27X Plasmide Double Nickase (h): sc-407628-NIC
- Specie Target: human
- 20 µg di DNA plasmidico purificato, pronto per trasfezione; sufficiente fino a 20 trasfezioni
- USP27X Plasmide Double Nickase (h) consiste in un paio di plasmidi ciascuno codificante una nucleasi Cas9 mutata D10A ed un RNA guida (gRNA) di 20 nt target specifico, disegnato per il silenziamento dell'espressione genica con una maggiore specificità rispetto alla controparte CRISPR/Cas9 KO
- Le sequenze di gRNA appaiate sono offset di circa 20 bp per permettere lo specifico doppio nicking Cas9 mediato che mima un DSB
- Un plasmide dei due contiene un gene per la resistenza alla puromicina per la selezione; l'altro plasmide nella coppia contiene un marker GFP per confermare la trasfezione visivamente.
- Il USP27X Double Nickase Plasmid (h) e il USP27X Double Nickase Plasmid (h2) codificano per distinti design di gRNA accoppiati che prendono di mira USP27X. Uno o entrambi i design potrebbero essere disponibili
Informazioni ordini
| Nome del prodotto | Codice del prodotto | UNITÀ | Prezzo | Quantità | Preferiti | |
USP27X Plasmide Double Nickase (h) | sc-407628-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
USP27X Plasmide Double Nickase (h2) | sc-407628-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
USP27X codifica una proteasi specifica per l’ubiquitina che rimuove catene di ubiquitina dalle proteine bersaglio per regolarne la stabilità, la localizzazione subcellulare e l’output di segnalazione. Come componente del macchinario di deubiquitinazione, USP27X contribuisce al controllo della proteostasi e alla modulazione di vie dipendenti dall’ubiquitina che influenzano la progressione del ciclo cellulare, le risposte allo stress e i programmi trascrizionali. La disregolazione della segnalazione mediata dall’ubiquitina e dell’attività delle deubiquitinasi è ampiamente implicata in difetti di mantenimento del genoma e in segnali di crescita aberranti, rendendo USP27X un nodo rilevante per studi meccanicistici della regolazione guidata dall’ubiquitina. L’USP27X umano è quindi di interesse nella ricerca sul rimodellamento delle vie di segnalazione e sulle perturbazioni del turnover proteico associate alle malattie.
USP27X Il plasmide Double Nickase (h) consiste in una coppia di plasmidi ingegnerizzati per l'editing ad alta specificità del locus USP27X nelle linee cellulari human. Ciascun plasmide esprime una nickasi Cas9 D10A e un sgRNA distinto che prende di mira filamenti di DNA opposti all'interno di USP27X. Quando indirizzate verso siti adiacenti su filamenti di DNA opposti, le due nickasi generano tagli a filamento singolo sfalsati che insieme producono una rottura a doppio filamento sfalsata, richiedendo un'attività coordinata sul bersaglio da entrambe le guide. La rottura del DNA risultante viene risolta da vie di riparazione cellulare endogene, più comunemente attraverso la giunzione non omologa delle estremità (NHEJ), portando a inserzioni o delezioni che interrompono la funzione di USP27X. Richiedendo il coinvolgimento di due sgRNA nel locus bersaglio, l'approccio a doppia nickasi migliora la specificità dell'editing e fornisce una strategia CRISPR complementare per applicazioni in cui è desiderato un controllo aggiuntivo sulla precisione del targeting.
Per supportare l'identificazione efficiente delle cellule modificate, un plasmide codifica la GFP per la visualizzazione fluorescente delle popolazioni trasfettate, mentre il plasmide di accompagnamento porta un gene di resistenza alla puromicina per la selezione antibiotica. Insieme, queste caratteristiche supportano l'arricchimento efficiente delle popolazioni co-trasfettate e semplificano la convalida dei cloni con USP27X interrotto.
Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.