Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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U2AF65 Plasmídeo duplo de Nickase (m): sc-423572-NIC
- alvos específicos: mouse
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- U2AF65O plasmídeo de dupla Nickase (m) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase U2AF65 (m) e o Plasmídeo Double Nickase U2AF65 (m2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para U2af2. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:U2AF65 Anticorpo (MC3): sc-53942
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
U2AF65 Plasmídeo duplo de Nickase (m) | sc-423572-NIC | 20 µg | $410.00 |
U2af2 codifica a proteína U2AF65 do camundongo, um fator essencial de splicing que se liga ao RNA, reconhece o trato polipirimidínico nos sítios de splicing 3′ e ajuda a recrutar o snRNP U2 durante as etapas iniciais da montagem do spliceossomo. Por meio de seus motivos de reconhecimento de RNA e de interações com U2AF35 e SF1, a U2AF65 coordena a definição de éxons e decisões de splicing alternativo que moldam a produção de isoformas de transcritos em diversas vias de sinalização e do ciclo celular. A perturbação do splicing dependente de U2AF65 pode alterar a maturação do mRNA, a exportação nuclear e a composição do proteoma, tornando U2af2 um ponto-chave para estudar a fidelidade do processamento de RNA. Programas de splicing desregulados e o desequilíbrio de fatores do spliceossomo estão amplamente implicados na biologia de tumores hematológicos e sólidos, bem como em mecanismos de doenças do neurodesenvolvimento e neurodegenerativas, sustentando o uso de modelos de U2af2 para investigar redes de splicing relevantes para doenças.
U2AF65 O Plasmídeo de Nickase Dupla (m) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus U2af2 em linhas celulares mouse. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de U2af2. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função U2af2. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com U2af2 interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.