TRMT1 CRISPR/Cas9 케이오 플라스미드 (h): sc-410018

개요

TRMT1은 tRNA 메틸전이효소 1을 암호화하는 RNA 변형 효소로, 여러 세포질 tRNA의 26번 위치에서 N2,N2-디메틸구아노신(m2,2G) 형성을 촉매합니다. 이 변형은 tRNA의 올바른 접힘과 해독 정확도를 뒷받침하여 전반적인 번역 효율과 단백질 항상성(proteostasis)에 영향을 미칩니다. TRMT1 활성은 RNA 에피전사체(epitranscriptomic) 조절을 세포 스트레스 반응과 연결하며, 성장과 분화 과정에서 단백질 합성 프로그램에 하위 영향을 미칩니다. TRMT1 기능의 변화는 신경발달 관련 표현형과 연관된 것으로 보고되어, tRNA 변형 역동성이 신경세포 및 스트레스 적응 유전자 발현을 어떻게 형성하는지 규명하는 데 유용한 표적이 됩니다.

TRMT1 CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (h)는 human 세포주에서 TRMT1 유전자의 표적 파괴를 위해 설계된 플라스미드 풀입니다. 각 플라스미드는 TRMT1 유전자 내의 서로 다른 부위를 표적으로 하는 고유한 단일 가이드 RNA(sgRNA)와 Streptococcus pyogenes Cas9 뉴클레아제를 함께 발현합니다. 또한 이 플라스미드들은 GFP를 암호화하여, 형광 현미경이나 유세포 분석기를 통해 성공적으로 형질전환된 세포를 형광으로 식별하고 농축할 수 있게 합니다.

다중 가이드 설계는 Cas9에 의한 이중 가닥 절단 형성 후 TRMT1의 개방 독서 틀(ORF)을 파괴하는 삽입 또는 결실(indel)이 발생할 가능성을 높입니다. CRISPR/Cas9 시스템에 의해 유발된 DNA 절단은 내인성 비동종 말단 결합(NHEJ) 경로를 통해 복구되며, 이는 종종 TRMT1 단백질 발현을 소멸시키는 프레임 시프트 돌연변이를 초래합니다.

이 CRISPR 녹아웃 시스템은 TRMT1 신호 전달 연구, 기능 유전체학 연구, 암 생물학 연구 및 인간 세포주에서의 치료 반응 평가를 위한 TRMT1 결핍 세포 모델을 효율적으로 생성할 수 있게 합니다.

주요 특징

• TRMT1 기능에 중요한 TRMT1 엑손을 표적하는 sgRNA
  전달을 단순화하기 위해 단일 플라스미드에서 SpCas9 및 sgRNA의 공동 발현
  형질전환된 세포 식별을 위한 GFP 리포터
  녹아웃 효율 향상을 위해 여러 TRMT1 게놈 부위를 표적하는 플라스미드 풀
  형질전환을 통한 전달과 호환

설계 변형

CRISPRs +/- HDR

• TRMT1 CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (h) 및 TRMT1 CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (h2)에 의해 암호화되는 gRNA는 TRMT1 유전자좌 내의 서로 다른 부위를 표적화합니다. 표적화 설계 중 하나 또는 둘 다 이용 가능할 수 있습니다. 구입 가능 여부는 관련 제품을 참조하십시오.
  TRMT1 HDR 플라스미드 (h) 및 TRMT1 HDR 플라스미드 (h2)에 의해 암호화되는
  HDR 기증자 컨스트럭트는 푸로마이신 내성 카세트와 RFP 리포터를 포함하며, 이는 CRISPR/Cas9 KO 설계에 해당하는 정의된 TRMT1 표적 부위에서의 상동성 유도 복구를 지원하기 위해 TRMT1 상동성 암으로 둘러싸여 있습니다. HDR 기증자의 재고 여부는 달라질 수 있습니다. 재고 여부는 관련 제품을 참조하십시오.

연구용으로만 사용하세요. 진단 또는 치료용이 아닙니다.