TRB-3 Lentiviral Activation Particles (h): sc-401746-LAC

TRIB3 kodiert die Tribbles-Pseudokinase 3 (TRB-3), einen katalytisch inaktiven, kinaseähnlichen Adapter, der die Signaltransduktion durch das Zusammenführen (Scaffolding) von Protein‑Protein‑Interaktionen moduliert. TRB-3 ist vor allem dafür bekannt, die PI3K/AKT-Achse durch Interaktion mit AKT negativ zu regulieren und dadurch Insulinsignale, den Zellstoffwechsel und stressadaptive Programme zu beeinflussen. Darüber hinaus integriert es Antworten auf Stress des endoplasmatischen Retikulums und kann mit MAPK- sowie TGF‑β/SMAD-assoziierten Signalwegen verschalten, wodurch Zellüberleben, Differenzierung und inflammatorische Signalgebung mitgeprägt werden. Eine dysregulierte TRIB3-Expression wurde mit Stoffwechselstörungen, kardiovaskulären und neurodegenerativen Prozessen sowie mit krebsrelevanten Phänotypen wie veränderter Apoptose und erhöhter Toleranz gegenüber Therapiestress in Verbindung gebracht, was TRIB3 zu einem nützlichen Knotenpunkt für signalwegfokussierte mechanistische Studien macht.

TRB-3 Lentivirale Aktivierungspartikel (h) erfüllen diesen Bedarf, indem sie das vollständige Transkriptionsaktivierungssystem des Synergistic Activation Mediator (SAM) in transduktionsbereite, hoch-titrige lentivirale Partikel verpacken und so eine effiziente TRIB3-Hochregulation über ein breiteres Spektrum menschlicher Zelltypen ermöglichen.

TRB-3 Lentivirale Aktivierungspartikel (h) liefern alle funktionellen Komponenten des Synergistic Activation Mediator (SAM)-Systems über lentivirale Transduktion. Das System umfasst drei Partikelpräparate, die gemeinsam in Zielzellen transduziert werden: eines, das für katalytisch inaktives dCas9 (Mutationen D10A und N863A) kodiert, das mit der VP64-Transaktivierungsdomäne und einem Blasticidin-Resistenzgen fusioniert ist; eines, das für das MS2-p65-HSF1-Fusionsprotein mit einem Hygromycin-Resistenzgen kodiert; und eines, das für eine zielspezifische 20-nt-sgRNA kodiert, die an zwei MS2-RNA-Aptamere mit einem Puromycin-Resistenzgen fusioniert ist. Nach der lentiviralen Transduktion und der genomischen Integration der Expressionskassetten werden die SAM-Komponenten stabil exprimiert und lagern sich am Zielort innerhalb der proximalen Promotorregion stromaufwärts der TRIB3-Transkriptionsstartstelle an, wo VP64, p65 und HSF1 kooperativ wirken, um endogene Transkriptionsmaschinerie zu rekrutieren und eine anhaltende Hochregulation der endogenen TRB-3-Expression zu bewirken. Die Verwendung von nuklease-inaktivem dCas9 verhindert die Einführung von Doppelstrangbrüchen in der DNA und bewahrt den nativen TRIB3-Genomlokus sowie die regulatorische Architektur.

Das lentivirale Format bietet mehrere praktische Vorteile: Die stabile genomische Integration unterstützt eine vererbbare Aktivierung über Zellteilungen hinweg; Partikelpräparate mit hohem Titer machen eine eigene Virusproduktion überflüssig; und die Kompatibilität mit primären, sich nicht teilenden und transfektionsresistenten Zelltypen erweitert die experimentellen Möglichkeiten. Eine erfolgreiche Transduktion kann durch eine dreifache Antibiotika-Selektion mit Puromycin, Hygromycin und Blasticidin bestätigt und verstärkt werden.

Nur für Forschungszwecke. Nicht für diagnostische oder therapeutische Zwecke bestimmt.