TRAP100 CRISPR/Cas9 케이오 플라스미드 (h): sc-417318

개요

MED24는 프로모터-인핸서 간 상호작용과 전사 개시를 조율하기 위해, 서열 특이적 전사인자와 RNA 중합효소 II를 연결해 주는 Mediator 복합체의 필수 소단위인 TRAP100을 암호화합니다. TRAP100은 핵 수용체에 의해 구동되는 전사를 비롯해, 세포주기 진행, 분화, 스트레스 반응에 대한 보다 광범위한 크로마틴 연관 조절 등 신호 의존적 유전자 조절 프로그램에 기여합니다. MED24를 포함한 Mediator 소단위의 교란은 발달 이상 및 종양성 전사 재배선과 연관된 전사 네트워크를 흔들 수 있으므로, MED24는 유전자 발현의 경로 수준 제어를 연구하는 데 유용한 노드입니다. 따라서 MED24/TRAP100의 기능은 암 생물학 및 유전자 조절 회로의 변화로 유발되는 기타 질환에서 전사 조절 이상을 연구하는 데 관련성이 큽니다.

TRAP100 CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (h)는 human 세포주에서 MED24 유전자의 표적 파괴를 위해 설계된 플라스미드 풀입니다. 각 플라스미드는 MED24 유전자 내의 서로 다른 부위를 표적으로 하는 고유한 단일 가이드 RNA(sgRNA)와 Streptococcus pyogenes Cas9 뉴클레아제를 함께 발현합니다. 또한 이 플라스미드들은 GFP를 암호화하여, 형광 현미경이나 유세포 분석기를 통해 성공적으로 형질전환된 세포를 형광으로 식별하고 농축할 수 있게 합니다.

다중 가이드 설계는 Cas9에 의한 이중 가닥 절단 형성 후 MED24의 개방 독서 틀(ORF)을 파괴하는 삽입 또는 결실(indel)이 발생할 가능성을 높입니다. CRISPR/Cas9 시스템에 의해 유발된 DNA 절단은 내인성 비동종 말단 결합(NHEJ) 경로를 통해 복구되며, 이는 종종 TRAP100 단백질 발현을 소멸시키는 프레임 시프트 돌연변이를 초래합니다.

이 CRISPR 녹아웃 시스템은 TRAP100 신호 전달 연구, 기능 유전체학 연구, 암 생물학 연구 및 인간 세포주에서의 치료 반응 평가를 위한 MED24 결핍 세포 모델을 효율적으로 생성할 수 있게 합니다.

주요 특징

• TRAP100 기능에 중요한 MED24 엑손을 표적하는 sgRNA
  전달을 단순화하기 위해 단일 플라스미드에서 SpCas9 및 sgRNA의 공동 발현
  형질전환된 세포 식별을 위한 GFP 리포터
  녹아웃 효율 향상을 위해 여러 MED24 게놈 부위를 표적하는 플라스미드 풀
  형질전환을 통한 전달과 호환

설계 변형

CRISPRs +/- HDR

• TRAP100 CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (h) 및 TRAP100 CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (h2)에 의해 암호화되는 gRNA는 MED24 유전자좌 내의 서로 다른 부위를 표적화합니다. 표적화 설계 중 하나 또는 둘 다 이용 가능할 수 있습니다. 구입 가능 여부는 관련 제품을 참조하십시오.
  TRAP100 HDR 플라스미드 (h) 및 TRAP100 HDR 플라스미드 (h2)에 의해 암호화되는
  HDR 기증자 컨스트럭트는 푸로마이신 내성 카세트와 RFP 리포터를 포함하며, 이는 CRISPR/Cas9 KO 설계에 해당하는 정의된 MED24 표적 부위에서의 상동성 유도 복구를 지원하기 위해 MED24 상동성 암으로 둘러싸여 있습니다. HDR 기증자의 재고 여부는 달라질 수 있습니다. 재고 여부는 관련 제품을 참조하십시오.

연구용으로만 사용하세요. 진단 또는 치료용이 아닙니다.