TRAF6 CRISPR/Cas9 KOプラスミド (m): sc-423497

概要

マウスTraf6は、E3ユビキチンリガーゼでありアダプターでもあるTRAF6をコードしており、TNF受容体スーパーファミリーおよびToll様受容体／IL-1受容体の下流シグナルを統合して、自然免疫および獲得免疫応答を制御します。TRAF6はK63結合型ユビキチン化反応を触媒し、TAK1複合体やIKK複合体の集合を促進することで、NF-κBおよびMAPKシグナル伝達と、それに伴う炎症、細胞生存、分化を制御する転写プログラムを駆動します。さらに、破骨細胞形成におけるRANK/RANKLシグナル伝達の中心因子でもあり、ユビキチン依存的な足場形成を介してオートファジー制御にも関与します。TRAF6シグナルの破綻は、炎症性病態、骨リモデリング異常、ならびにNF-κB／MAPK活性化やユビキチン経路の再配線が顕著な腫瘍性シグナル伝達の文脈において、病態形成に関与すると示唆されています。

TRAF6 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（m）は、mouse細胞株におけるTraf6遺伝子の標的破壊を目的として設計されたプラスミドのプールである。各プラスミドは、Traf6内の異なる部位を標的とする固有のシングルガイドRNA（sgRNA）と、Streptococcus pyogenes由来のCas9ヌクレアーゼを共発現します。また、これらのプラスミドはGFPをコードしており、蛍光顕微鏡やフローサイトメトリーを用いて、トランスフェクションに成功した細胞を蛍光で識別・濃縮することが可能です。

このマルチガイド設計により、Cas9による二本鎖切断の形成後に、Traf6のオープンリーディングフレームを破壊する挿入または欠失（インデル）が生じる可能性が高まります。CRISPR/Cas9システムによって導入されたDNA切断は、内因性の非相同末端結合（NHEJ）経路を通じて修復され、その結果、TRAF6タンパク質の発現を阻害するフレームシフト変異が生じることが頻繁にあります。

このCRISPRノックアウトシステムにより、TRAF6シグナル伝達、機能ゲノミクス研究、がん生物学研究、およびヒト細胞株における治療反応の評価を目的とした、Traf6欠損細胞モデルの効率的な作製が可能となる。

主な特徴

• TRAF6の機能に不可欠なTraf6エクソンを標的とするsgRNA
  導入を簡素化するための、単一プラスミドからのSpCas9およびsgRNAの共発現
  トランスフェクトされた細胞を識別するためのGFPレポーター
  ノックアウト効率を向上させるための、Traf6ゲノム上の複数の部位を標的とするプラスミドのプール
  トランスフェクションによる導入に対応

設計バリエーション

CRISPRs +/- HDR

• TRAF6 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（m）およびTRAF6 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（m2）によってコードされるgRNAは、Traf6遺伝子座内の異なる部位を標的としています。いずれか一方、または両方の標的設計が利用可能な場合があります。入手可能性については「関連製品」を参照してください。
  TRAF6 HDRプラスミド（m）および TRAF6 HDRプラスミド（m2）によってコードされるHDRドナー構築体は、プロマイシン耐性カセットとRFPレポーターを含み、これらはTraf6ホモロジーアームに挟まれており、CRISPR/Cas9 KO設計に対応する特定のTraf6標的部位でのホモロジー依存修復をサポートします。HDRドナーの入手可能性は異なる場合があります。入手可能性については「関連製品」をご確認ください。

研究用のみ。診断用または治療用ではありません。