TIM-3 Lentiviral Activation Particles (h): sc-416365-LAC

HAVCR2は、T細胞免疫グロブリン／ムチン様ドメイン含有タンパク質3（TIM-3）をコードしている。TIM-3は、活性化T細胞をはじめとするさまざまな免疫細胞サブセットに発現する免疫調節性受容体で、エフェクター機能、疲弊（エキゾースチョン）、末梢免疫寛容の度合いを調整する。TIM-3シグナルはチェックポイント制御や炎症性回路と連動し、サイトカイン産生、抗原特異的応答、免疫活性化と免疫抑制のバランスに影響を与える。HAVCR2/TIM-3活性の破綻は、慢性感染や腫瘍関連の免疫機能不全と関連しているほか、T細胞分化や骨髄系細胞とのクロストークへの影響を介して、自己免疫疾患や炎症性疾患の文脈にも関与すると考えられている。これらの特性により、HAVCR2は免疫回避、免疫寛容の破綻、免疫細胞状態遷移の機構を解明するための重要な標的となる。

TIM-3 レンチウイルス活性化粒子（h）は、完全な相乗的活性化メディエーター（SAM）転写活性化システムを、トランスダクション可能な高力価レンチウイルス粒子に封入することでこのニーズに対応し、より広範なヒト細胞タイプにおいて効率的なHAVCR2の発現上昇を可能にします。

TIM-3 レンチウイルス活性化粒子（h）は、レンチウイルス媒介を介して、シナジー活性化メディエーター（SAM）システムのすべての機能的構成要素を届ける。このシステムは、標的細胞へ共導入される3種類の粒子製剤で構成されています。1つは、VP64転写活性化ドメインとブラスティシジン耐性遺伝子を融合させた、触媒活性のないdCas9（D10AおよびN863A変異）をコードするものです。ヒグロマイシン耐性遺伝子を有するMS2-p65-HSF1融合タンパク質をコードするもの；および、2つのMS2 RNAアプタマーと融合した標的特異的20塩基対sgRNAをコードし、プロマイシン耐性遺伝子を有するもの。レンチウイルスによる導入および発現カセットのゲノムへの組み込み後、SAM構成要素は安定して発現し、HAVCR2転写開始点の上流にある近位プロモーター領域内の標的座に集合する。そこでは、VP64、p65、およびHSF1が協調して作用し、内因性の転写機構を動員して、内因性TIM-3の発現を持続的に上向きに調節する。ヌクレアーゼ不活性型dCas9を使用することで、二本鎖DNA切断の導入を回避し、天然のHAVCR2ゲノム座および制御機構を維持します。

レンチウイルス形式には、いくつかの実用的な利点があります。安定したゲノム組み込みにより、細胞分裂を経ても遺伝的に継承される活性化がサポートされます。高力価の粒子調製により、施設内でのウイルス生産の必要性がなくなります。また、初代培養細胞、非増殖性細胞、およびトランスフェクション抵抗性細胞との互換性により、実験の適用範囲が広がります。成功したトランスダクションは、プロマイシン、ハイグロマイシン、ブラスティシジンを用いた三重抗生物質選別により確認および選別が可能である。

研究用のみ。診断用または治療用ではありません。