TIM-3 CRISPR/Cas9 케이오 플라스미드 (m): sc-431363

개요

Havcr2는 면역조절 수용체인 TIM-3를 암호화하며, TIM-3는 활성화된 T 세포, 조절 T 세포, 수지상세포 및 선천면역계 하위 집단 등 여러 면역세포 계통에서 발현되는 I형 막단백질이다. TIM-3는 항원 자극 상황에서 사이토카인 생성과 면역 시냅스 기능에 영향을 주면서, T 세포 활성화 역치, 면역 관용, 효과기 분화의 방향을 결정하는 신호들을 통합한다. TIM-3는 갈렉틴-9, 포스파티딜세린과 같은 리간드와의 상호작용을 통해 T 세포 기능 이상 및 만성 항원 노출과 연관된 경로에 기여하며, 면역 탈진 프로그램 및 염증 회로 조절과도 맞닿아 있다. 마우스 모델에서 Havcr2/TIM-3의 생물학적 기능은 자가면역, 만성 감염, 종양 면역학 등의 맥락에서 면역 항상성과 조직 특이적 염증을 이해하기 위해 폭넓게 연구된다.

TIM-3 CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (m)는 mouse 세포주에서 Havcr2 유전자의 표적 파괴를 위해 설계된 플라스미드 풀입니다. 각 플라스미드는 Havcr2 유전자 내의 서로 다른 부위를 표적으로 하는 고유한 단일 가이드 RNA(sgRNA)와 Streptococcus pyogenes Cas9 뉴클레아제를 함께 발현합니다. 또한 이 플라스미드들은 GFP를 암호화하여, 형광 현미경이나 유세포 분석기를 통해 성공적으로 형질전환된 세포를 형광으로 식별하고 농축할 수 있게 합니다.

다중 가이드 설계는 Cas9에 의한 이중 가닥 절단 형성 후 Havcr2의 개방 독서 틀(ORF)을 파괴하는 삽입 또는 결실(indel)이 발생할 가능성을 높입니다. CRISPR/Cas9 시스템에 의해 유발된 DNA 절단은 내인성 비동종 말단 결합(NHEJ) 경로를 통해 복구되며, 이는 종종 TIM-3 단백질 발현을 소멸시키는 프레임 시프트 돌연변이를 초래합니다.

이 CRISPR 녹아웃 시스템은 TIM-3 신호 전달 연구, 기능 유전체학 연구, 암 생물학 연구 및 인간 세포주에서의 치료 반응 평가를 위한 Havcr2 결핍 세포 모델을 효율적으로 생성할 수 있게 합니다.

주요 특징

• TIM-3 기능에 중요한 Havcr2 엑손을 표적하는 sgRNA
  전달을 단순화하기 위해 단일 플라스미드에서 SpCas9 및 sgRNA의 공동 발현
  형질전환된 세포 식별을 위한 GFP 리포터
  녹아웃 효율 향상을 위해 여러 Havcr2 게놈 부위를 표적하는 플라스미드 풀
  형질전환을 통한 전달과 호환

설계 변형

CRISPRs +/- HDR

• TIM-3 CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (m) 및 TIM-3 CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (m2)에 의해 암호화되는 gRNA는 Havcr2 유전자좌 내의 서로 다른 부위를 표적화합니다. 표적화 설계 중 하나 또는 둘 다 이용 가능할 수 있습니다. 구입 가능 여부는 관련 제품을 참조하십시오.
  TIM-3 HDR 플라스미드 (m) 및 TIM-3 HDR 플라스미드 (m2)에 의해 암호화되는
  HDR 기증자 컨스트럭트는 푸로마이신 내성 카세트와 RFP 리포터를 포함하며, 이는 CRISPR/Cas9 KO 설계에 해당하는 정의된 Havcr2 표적 부위에서의 상동성 유도 복구를 지원하기 위해 Havcr2 상동성 암으로 둘러싸여 있습니다. HDR 기증자의 재고 여부는 달라질 수 있습니다. 재고 여부는 관련 제품을 참조하십시오.

연구용으로만 사용하세요. 진단 또는 치료용이 아닙니다.