TCTE2 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m): sc-423316

Visão geral

Tcte2 codifica a TCTE2, uma proteína associada a cílios e flagelos implicada na montagem e na função de axonemas móveis em células de camundongo. Ao apoiar o deslizamento de microtúbulos impulsionado por dineína e o batimento ciliar coordenado, a TCTE2 contribui para processos como a maturação de espermátides e a motilidade dos espermatozoides, conectando-a à biologia reprodutiva e à ciliogênese. De modo geral, a desregulação de componentes de cílios móveis pode afetar a depuração mucociliar, o fluxo do líquido cefalorraquidiano e o estabelecimento da assimetria esquerda–direita, tornando a TCTE2 relevante para estudos mecanísticos de ciliopatias. Assim, a TCTE2 é útil para investigar a organização axonemal, a homeostase associada ao transporte intraflagelar e as consequências, específicas de cada tipo celular, do comprometimento da motilidade.

O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO TCTE2 (m) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene Tcte2 em linhas celulares mouse. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do Tcte2, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.

O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do Tcte2 na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína TCTE2.

Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de Tcte2 para a investigação da sinalização de TCTE2, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.

Características principais

• sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) Tcte2 críticos para a função TCTE2
  Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
  Repórter GFP para identificação de células transfectadas
  Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos Tcte2 para melhorar a eficiência do knockout
  Compatível com administração por transfecção

Variantes de Design

CRISPRs +/- HDRs

• Os gRNAs codificados pelo TCTE2 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m) e pelo TCTE2 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m2) têm como alvo locais distintos dentro do locus Tcte2. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
  As construções doadoras HDR codificadas pelo TCTE2 Plasmídeo HDR (m) e o Plasmídeo HDR TCTE2 (m2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia Tcte2 para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo Tcte2 definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.

Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.