SUMF1 CRISPR/Cas9 케이오 플라스미드 (h): sc-406543

개요

SUMF1은 모든 설파타아제의 번역 후 활성화를 위해 필요한 소포체(ER) 내강의 산화효소인 포밀글라이신 생성 효소(FGE)를 암호화하며, 보존된 시스테인을 Cα-포밀글라이신으로 전환함으로써 이를 수행합니다. 이 변형은 리소좀 및 세포외에서의 황산 에스터 가수분해에 필수적이며, SUMF1을 글리코사미노글리칸 턴오버, 스핑고지질 대사, 그리고 더 넓은 리소좀 의존성 분해 경로와 연결합니다. SUMF1의 기능이 손상되면 전반적인 설파타아제 활성이 감소하고, 기질 제거 장애 및 세포 항상성 변화가 특징인 리소좀 축적(저장) 표현형으로 이어질 수 있습니다. 따라서 SUMF1은 설파타아제 생물학, 리소좀 기능, 그리고 다중 설파타아제 결핍과 연관된 발병 기전 연구에서 널리 다뤄집니다.

SUMF1 CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (h)는 human 세포주에서 SUMF1 유전자의 표적 파괴를 위해 설계된 플라스미드 풀입니다. 각 플라스미드는 SUMF1 유전자 내의 서로 다른 부위를 표적으로 하는 고유한 단일 가이드 RNA(sgRNA)와 Streptococcus pyogenes Cas9 뉴클레아제를 함께 발현합니다. 또한 이 플라스미드들은 GFP를 암호화하여, 형광 현미경이나 유세포 분석기를 통해 성공적으로 형질전환된 세포를 형광으로 식별하고 농축할 수 있게 합니다.

다중 가이드 설계는 Cas9에 의한 이중 가닥 절단 형성 후 SUMF1의 개방 독서 틀(ORF)을 파괴하는 삽입 또는 결실(indel)이 발생할 가능성을 높입니다. CRISPR/Cas9 시스템에 의해 유발된 DNA 절단은 내인성 비동종 말단 결합(NHEJ) 경로를 통해 복구되며, 이는 종종 SUMF1 단백질 발현을 소멸시키는 프레임 시프트 돌연변이를 초래합니다.

이 CRISPR 녹아웃 시스템은 SUMF1 신호 전달 연구, 기능 유전체학 연구, 암 생물학 연구 및 인간 세포주에서의 치료 반응 평가를 위한 SUMF1 결핍 세포 모델을 효율적으로 생성할 수 있게 합니다.

주요 특징

• SUMF1 기능에 중요한 SUMF1 엑손을 표적하는 sgRNA
  전달을 단순화하기 위해 단일 플라스미드에서 SpCas9 및 sgRNA의 공동 발현
  형질전환된 세포 식별을 위한 GFP 리포터
  녹아웃 효율 향상을 위해 여러 SUMF1 게놈 부위를 표적하는 플라스미드 풀
  형질전환을 통한 전달과 호환

설계 변형

CRISPRs +/- HDR

• SUMF1 CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (h) 및 SUMF1 CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (h2)에 의해 암호화되는 gRNA는 SUMF1 유전자좌 내의 서로 다른 부위를 표적화합니다. 표적화 설계 중 하나 또는 둘 다 이용 가능할 수 있습니다. 구입 가능 여부는 관련 제품을 참조하십시오.
  SUMF1 HDR 플라스미드 (h) 및 SUMF1 HDR 플라스미드 (h2)에 의해 암호화되는
  HDR 기증자 컨스트럭트는 푸로마이신 내성 카세트와 RFP 리포터를 포함하며, 이는 CRISPR/Cas9 KO 설계에 해당하는 정의된 SUMF1 표적 부위에서의 상동성 유도 복구를 지원하기 위해 SUMF1 상동성 암으로 둘러싸여 있습니다. HDR 기증자의 재고 여부는 달라질 수 있습니다. 재고 여부는 관련 제품을 참조하십시오.

연구용으로만 사용하세요. 진단 또는 치료용이 아닙니다.