Plasmide Double Nickase (h) SULT1A1: sc-417793-NIC
- Espèces cibles: human
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- Le Plasmide Double Nickase (h) SULT1A1 correspond à une paire de plasmides chacun codant la nucléase Cas9 mutante D10A et un ARN guide (gARN) cible de 20 nt specifique, élaboré pour le knockout optimal de l'expression d'un gène avec une plus grande spécificité que le plasmide KO CRISPR/Cas9 correspondant.
- Les séquences des paires d'ARNg sont décalées de 20 pb environ pour induire avec la Cas9 une double entaille spécifique de l'ADN génomique, qui imite un DSB
- L'un des plasmides de la paire contient un gène de résistance à la puromycine; l'autre plasmide de la paire contient un marqueur GFP pour confirmer visuellement la transfection
- Le plasmide SULT1A1 Double Nickase (h) et le plasmide SULT1A1 Double Nickase (h2) codent pour des paires distinctes de gRNA ciblant SULT1A1. Un ou les deux modèles peuvent être disponibles
- Après transfection, l'efficacité de knockout de gène peut être évaluée par WB, IF ou IHC en utilisant l'anticorps: SULT1A1 Antibody (214E2Z): sc-517645
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide Double Nickase (h) SULT1A1 | sc-417793-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plasmide Double Nickase (h2) SULT1A1 | sc-417793-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
Le gène humain **SULT1A1** code une sulfotransférase cytosolique qui catalyse la conjugaison au sulfate de xénobiotiques phénoliques, d’hormones endogènes et de diverses petites molécules, modifiant ainsi leur solubilité, leur biodisponibilité et leur élimination. Cette enzyme de métabolisme de phase II participe aux processus de détoxification chimique et de bioactivation en générant des esters sulfates qui peuvent soit faciliter l’excrétion, soit créer des intermédiaires réactifs selon le contexte du substrat. L’activité de SULT1A1 s’inscrit dans des réseaux plus larges de réponse aux xénobiotiques et de maintien de l’équilibre rédox, via une régulation coordonnée des voies de conjugaison et de la gestion des métabolites. Les variations d’expression ou de fonction de SULT1A1 ont été étudiées en lien avec les différences interindividuelles du métabolisme des médicaments et des carcinogènes, ainsi qu’avec la susceptibilité au stress cellulaire induit par des agents chimiques.
SULT1A1 Le plasmide double nickase (h) se compose d'une paire de plasmides appariés, conçus pour une édition hautement spécifique du locus SULT1A1 dans les lignées cellulaires human. Chaque plasmide exprime une nickase Cas9 D10A et un sgRNA distinct ciblant des brins d'ADN opposés au sein de SULT1A1. Lorsqu'elles sont dirigées vers des sites adjacents sur des brins d'ADN opposés, les deux nickases génèrent des cassures simple brin décalées qui, ensemble, produisent une cassure double brin décalée, nécessitant une activité coordonnée sur la cible de la part des deux guides. La cassure d'ADN qui en résulte est résolue par les voies de réparation cellulaires endogènes, le plus souvent par jonction non homologue (NHEJ), ce qui conduit à des insertions ou des délétions qui perturbent la fonction de SULT1A1. En nécessitant l'engagement de deux ARNsg au locus cible, l'approche par double nick améliore la spécificité de l'édition et offre une stratégie CRISPR complémentaire pour les applications où un contrôle supplémentaire de la précision du ciblage est souhaité.
Afin de faciliter l'identification efficace des cellules éditées, un plasmide code pour la GFP permettant la visualisation par fluorescence des populations transfectées, tandis que le plasmide compagnon porte un gène de résistance à la puromycine pour la sélection antibiotique. Ensemble, ces caractéristiques favorisent l'enrichissement efficace des populations co-transfectées et simplifient la validation des clones présentant une perturbation de SULT1A1.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.