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SPRED2 Plasmide KO CRISPR/Cas9 (h) | sc-404738 | 20 µg | $397.00 |
SPRED2 (sprouty related EVH1 domain containing 2) codifica una proteina adattatrice citosolica che regola negativamente la segnalazione delle tirosin-chinasi recettoriali inibendo la cascata Ras–Raf–MEK–ERK/MAPK. Attraverso interazioni con componenti quali Raf e neurofibromina, SPRED2 contribuisce a limitare la proliferazione, la differenziazione e la segnalazione infiammatoria guidate dai fattori di crescita, favorendo il controllo omeostatico delle risposte cellulari. Alterazioni dell’espressione o della funzione di SPRED2 sono state associate a un’attività MAPK disregolata nella biologia del cancro e a processi immunitari e infiammatori, inclusi contesti che coinvolgono una segnalazione aberrante di citochine e chemochine. In quanto “freno” della via, SPRED2 è spesso studiata per il suo ruolo nel modulare ampiezza e durata della segnalazione a valle delle RTK e di altri input a monte che convergono su ERK.
Il plasmide CRISPR/Cas9 KO SPRED2 (h) è un pool di plasmidi progettato per la distruzione mirata del gene SPRED2 in linee cellulari human. Ciascun plasmide co-esprime un singolo RNA guida (sgRNA) unico che prende di mira un sito distinto all'interno del SPRED2 insieme alla nucleasi Cas9 di Streptococcus pyogenes. I plasmidi codificano anche per la GFP, consentendo l'identificazione fluorescente e l'arricchimento delle cellule trasfettate con successo tramite microscopia a fluorescenza o citometria a flusso.
Il design multi-guida aumenta la probabilità di generare inserzioni o delezioni (indels) che interrompono il frame di lettura aperto SPRED2 a seguito della formazione di rotture a doppio filamento mediate da Cas9. Le rotture del DNA introdotte dal sistema CRISPR/Cas9 vengono riparate attraverso vie endogene di giunzione non omologa (NHEJ), che spesso provocano mutazioni con spostamento del frame che annullano l'espressione della proteina SPRED2.
Questo sistema di knockout CRISPR consente la generazione efficiente di modelli cellulari carenti di SPRED2 per lo studio della segnalazione di SPRED2, studi di genomica funzionale, ricerca sulla biologia del cancro e valutazione delle risposte terapeutiche in linee cellulari umane.
CRISPR +/- HDR
Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.