SPRED2 CRISPR/Cas9 케이오 플라스미드 (h): sc-404738

개요

SPRED2(sprouty related EVH1 domain containing 2)는 Ras–Raf–MEK–ERK/MAPK 연쇄 반응을 억제함으로써 수용체 티로신 키나아제 신호전달을 음성 조절하는 세포질 어댑터 단백질을 암호화합니다. SPRED2는 Raf, 뉴로파이브로민(neurofibromin) 등 구성 요소와의 상호작용을 통해 성장인자에 의해 유도되는 증식, 분화 및 염증성 신호를 제한하여 세포 반응의 항상성 조절에 기여합니다. SPRED2의 발현 또는 기능 변화는 암 생물학에서 MAPK 활성의 이상 조절, 그리고 비정상적인 사이토카인 및 케모카인 신호전달이 관여하는 경우를 포함한 면역 및 염증 과정과 연관되어 있는 것으로 보고되었습니다. 경로의 ‘브레이크’로서 SPRED2는 RTK 및 ERK로 수렴하는 기타 상위 입력 하류에서 신호의 세기와 지속시간을 미세 조정하는 역할로 인해 자주 연구됩니다.

SPRED2 CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (h)는 human 세포주에서 SPRED2 유전자의 표적 파괴를 위해 설계된 플라스미드 풀입니다. 각 플라스미드는 SPRED2 유전자 내의 서로 다른 부위를 표적으로 하는 고유한 단일 가이드 RNA(sgRNA)와 Streptococcus pyogenes Cas9 뉴클레아제를 함께 발현합니다. 또한 이 플라스미드들은 GFP를 암호화하여, 형광 현미경이나 유세포 분석기를 통해 성공적으로 형질전환된 세포를 형광으로 식별하고 농축할 수 있게 합니다.

다중 가이드 설계는 Cas9에 의한 이중 가닥 절단 형성 후 SPRED2의 개방 독서 틀(ORF)을 파괴하는 삽입 또는 결실(indel)이 발생할 가능성을 높입니다. CRISPR/Cas9 시스템에 의해 유발된 DNA 절단은 내인성 비동종 말단 결합(NHEJ) 경로를 통해 복구되며, 이는 종종 SPRED2 단백질 발현을 소멸시키는 프레임 시프트 돌연변이를 초래합니다.

이 CRISPR 녹아웃 시스템은 SPRED2 신호 전달 연구, 기능 유전체학 연구, 암 생물학 연구 및 인간 세포주에서의 치료 반응 평가를 위한 SPRED2 결핍 세포 모델을 효율적으로 생성할 수 있게 합니다.

주요 특징

• SPRED2 기능에 중요한 SPRED2 엑손을 표적하는 sgRNA
  전달을 단순화하기 위해 단일 플라스미드에서 SpCas9 및 sgRNA의 공동 발현
  형질전환된 세포 식별을 위한 GFP 리포터
  녹아웃 효율 향상을 위해 여러 SPRED2 게놈 부위를 표적하는 플라스미드 풀
  형질전환을 통한 전달과 호환

설계 변형

CRISPRs +/- HDR

• SPRED2 CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (h) 및 SPRED2 CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (h2)에 의해 암호화되는 gRNA는 SPRED2 유전자좌 내의 서로 다른 부위를 표적화합니다. 표적화 설계 중 하나 또는 둘 다 이용 가능할 수 있습니다. 구입 가능 여부는 관련 제품을 참조하십시오.
  SPRED2 HDR 플라스미드 (h) 및 SPRED2 HDR 플라스미드 (h2)에 의해 암호화되는
  HDR 기증자 컨스트럭트는 푸로마이신 내성 카세트와 RFP 리포터를 포함하며, 이는 CRISPR/Cas9 KO 설계에 해당하는 정의된 SPRED2 표적 부위에서의 상동성 유도 복구를 지원하기 위해 SPRED2 상동성 암으로 둘러싸여 있습니다. HDR 기증자의 재고 여부는 달라질 수 있습니다. 재고 여부는 관련 제품을 참조하십시오.

연구용으로만 사용하세요. 진단 또는 치료용이 아닙니다.