SPACA1 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h): sc-406974

Visão geral

SPACA1 (sperm acrosome associated 1) codifica uma proteína acrossomal implicada na morfogênese da cabeça do espermatozoide e na biogênese/organização das membranas do acrossoma durante a espermiogênese. Sua função está ligada a processos de diferenciação de células germinativas masculinas que dependem de tráfego vesicular coordenado, remodelamento de membranas e organização do citoesqueleto para sustentar a formação do acrossoma e a competência para a fertilização. A atividade alterada de SPACA1 tem sido associada, em contextos experimentais, a defeitos na estrutura do espermatozoide e à redução da fertilidade masculina, tornando-o relevante para o estudo de mecanismos de falha espermatogênica. Como um fator com expressão enriquecida nos testículos, SPACA1 também é útil como marcador e como nó funcional em vias que regem o desenvolvimento de gametas e a biologia reprodutiva.

O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO SPACA1 (h) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene SPACA1 em linhas celulares human. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do SPACA1, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.

O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do SPACA1 na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína SPACA1.

Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de SPACA1 para a investigação da sinalização de SPACA1, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.

Características principais

• sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) SPACA1 críticos para a função SPACA1
  Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
  Repórter GFP para identificação de células transfectadas
  Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos SPACA1 para melhorar a eficiência do knockout
  Compatível com administração por transfecção

Variantes de Design

CRISPRs +/- HDRs

• Os gRNAs codificados pelo SPACA1 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) e pelo SPACA1 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h2) têm como alvo locais distintos dentro do locus SPACA1. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
  As construções doadoras HDR codificadas pelo SPACA1 Plasmídeo HDR (h) e o Plasmídeo HDR SPACA1 (h2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia SPACA1 para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo SPACA1 definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.

Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.