Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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SPA-1 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h): sc-406755
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- SPA-1 O Plasmídeo CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (h) é um conjunto de plasmídeos, cada um codificando a nuclease Cas9 e um RNA guia (gRNA) de 20 nt específico para o alvo, concebido para uma eficiência máxima de knockout utilizando sequências derivadas da biblioteca GeCKO v2
- As sequências de gRNA direcionam a Cas9 para induzir quebras de cadeia dupla (DSBs) específicas do local no locus genómico SPA-1, resultando no knockout do gene através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ)
- Os genes de resistência à puromicina e RFP são flanqueados por sítios LoxP, permitindo a remoção de marcadores de seleção através da recombinase Cre (Cre Vector: sc-418923) após o estabelecimento de linhas celulares knockout estáveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:SPA-1 Anticorpo (B-7): sc-166219
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
SPA-1 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) | sc-406755 | 20 µg | $397.00 |
Visão geral
SIPA1 codifica a SPA-1, uma proteína ativadora de GTPase (GAP) de Rap1 que acelera a hidrólise de GTP para limitar a sinalização de Rap1 e ajustar a adesão mediada por integrinas, a dinâmica do citoesqueleto e a migração celular. Ao modular a sinalização “inside-out” dependente de Rap1, a SPA-1 influencia o tráfego de células imunes, a estabilidade de junções célula–célula e as respostas a estímulos extracelulares. Alterações na expressão ou na atividade de SIPA1 têm sido associadas a programas desregulados de proliferação e motilidade relevantes para a progressão tumoral e o potencial metastático. Essa biologia torna SIPA1 um nó útil para estudar redes de pequenas GTPases, sinalização dependente de adesão e comportamentos celulares conduzidos pelo microambiente.
O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO SPA-1 (h) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene SIPA1 em linhas celulares human. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do SIPA1, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.
O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do SIPA1 na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína SPA-1.
Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de SIPA1 para a investigação da sinalização de SPA-1, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.
Características principais
- sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) SIPA1 críticos para a função SPA-1
Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
Repórter GFP para identificação de células transfectadas
Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos SIPA1 para melhorar a eficiência do knockout
Compatível com administração por transfecção
Variantes de Design
CRISPRs +/- HDRs
- Os gRNAs codificados pelo SPA-1 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) e pelo SPA-1 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h2) têm como alvo locais distintos dentro do locus SIPA1. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
As construções doadoras HDR codificadas pelo SPA-1 Plasmídeo HDR (h) e o Plasmídeo HDR SPA-1 (h2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia SIPA1 para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo SIPA1 definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.