Plasmide Double Nickase (m) Sox10: sc-423078-NIC
- Espèces cibles: mouse
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- Le Plasmide Double Nickase (m) Sox10 correspond à une paire de plasmides chacun codant la nucléase Cas9 mutante D10A et un ARN guide (gARN) cible de 20 nt specifique, élaboré pour le knockout optimal de l'expression d'un gène avec une plus grande spécificité que le plasmide KO CRISPR/Cas9 correspondant.
- Les séquences des paires d'ARNg sont décalées de 20 pb environ pour induire avec la Cas9 une double entaille spécifique de l'ADN génomique, qui imite un DSB
- L'un des plasmides de la paire contient un gène de résistance à la puromycine; l'autre plasmide de la paire contient un marqueur GFP pour confirmer visuellement la transfection
- Le plasmide Sox10 Double Nickase (m) et le plasmide Sox10 Double Nickase (m2) codent pour des paires distinctes de gRNA ciblant Sox10. Un ou les deux modèles peuvent être disponibles
- Après transfection, l'efficacité de knockout de gène peut être évaluée par WB, IF ou IHC en utilisant l'anticorps: Sox10 Antibody (A-2): sc-365692
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide Double Nickase (m) Sox10 | sc-423078-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plasmide Double Nickase (m2) Sox10 | sc-423078-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
Sox10 chez la souris code un facteur de transcription à domaine HMG (HMG-box) qui contrôle la spécification des lignages de la crête neurale ainsi que la différenciation et le maintien des cellules gliales myélinisantes, notamment les cellules de Schwann et les oligodendrocytes. Sox10 coordonne des programmes transcriptionnels avec des partenaires tels que PAX3 et SOX9 afin de réguler des gènes impliqués dans la formation de la myéline, le développement des nerfs périphériques et la biologie des mélanocytes. Par l’intermédiaire de ces réseaux, Sox10 influence des processus allant de l’engagement du destin cellulaire à la migration et à la maturation, et sa dérégulation est associée à des neurocristopathies congénitales ainsi qu’à des anomalies de la pigmentation ou du système nerveux entérique. En biologie du cancer, l’altération de l’expression génique dépendante de SOX10 est largement utilisée pour étudier, dans des systèmes modèles pertinents, l’état de lignée du mélanome, les programmes d’invasion et la plasticité transcriptionnelle.
Sox10 Le plasmide double nickase (m) se compose d'une paire de plasmides appariés, conçus pour une édition hautement spécifique du locus Sox10 dans les lignées cellulaires mouse. Chaque plasmide exprime une nickase Cas9 D10A et un sgRNA distinct ciblant des brins d'ADN opposés au sein de Sox10. Lorsqu'elles sont dirigées vers des sites adjacents sur des brins d'ADN opposés, les deux nickases génèrent des cassures simple brin décalées qui, ensemble, produisent une cassure double brin décalée, nécessitant une activité coordonnée sur la cible de la part des deux guides. La cassure d'ADN qui en résulte est résolue par les voies de réparation cellulaires endogènes, le plus souvent par jonction non homologue (NHEJ), ce qui conduit à des insertions ou des délétions qui perturbent la fonction de Sox10. En nécessitant l'engagement de deux ARNsg au locus cible, l'approche par double nick améliore la spécificité de l'édition et offre une stratégie CRISPR complémentaire pour les applications où un contrôle supplémentaire de la précision du ciblage est souhaité.
Afin de faciliter l'identification efficace des cellules éditées, un plasmide code pour la GFP permettant la visualisation par fluorescence des populations transfectées, tandis que le plasmide compagnon porte un gène de résistance à la puromycine pour la sélection antibiotique. Ensemble, ces caractéristiques favorisent l'enrichissement efficace des populations co-transfectées et simplifient la validation des clones présentant une perturbation de Sox10.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.