Particules Lentivirales d'Activation (h) Sox-4: sc-401217-LAC

Le gène humain **SOX4** code le facteur de transcription **Sox-4**, membre de la famille **SRY-related HMG-box**, qui se lie à l’ADN et coordonne des programmes de régulation génique dépendants du contexte au cours du développement et du maintien de l’homéostasie tissulaire. L’activité de Sox-4 influence la spécification du destin cellulaire, les réseaux transcriptionnels associés à la transition épithélio-mésenchymateuse et les processus de différenciation, en interaction avec des voies de signalisation telles que **Wnt/β-caténine**, **TGF-β** et **Notch**. Une expression dérégulée de **SOX4** a été associée à des modifications de la prolifération, à des états de type « cellules souches » et à des phénotypes liés à l’invasion dans de nombreux contextes de cancers et de maladies hématologiques ; le gène est également étudié en neurodéveloppement et en immunologie. En tant que régulateur nucléaire doté de nombreuses cibles en aval, **SOX4** constitue un nœud accessible pour disséquer les circuits transcriptionnels, les dépendances liées à l’état de la chromatine et la plasticité des lignages.

Les particules d'activation lentivirales Sox-4 (h) répondent à ce besoin en encapsulant le système complet d'activation transcriptionnelle SAM (Synergistic Activation Mediator) dans des particules lentivirales à titre élevé prêtes à la transduction, permettant une régulation à la hausse efficace de SOX4 dans un plus large éventail de types de cellules humaines.

Les particules d'activation lentivirales Sox-4 (h) délivrent tous les composants fonctionnels du système médiateur d'activation synergique (SAM) via la transduction lentivirale. Le système comprend trois préparations de particules co-transduites dans les cellules cibles : l'une codant pour une dCas9 catalytiquement inactive (mutations D10A et N863A) fusionnée au domaine de transactivation VP64 avec un gène de résistance à la blasticidine ; une codant pour la protéine de fusion MS2-p65-HSF1 avec un gène de résistance à l'hygromycine ; et une codant pour un ARNsg de 20 nt spécifique de la cible, fusionné à deux aptamères d'ARN MS2 avec un gène de résistance à la puromycine. Après transduction lentivirale et intégration génomique des cassettes d'expression, les composants du SAM sont exprimés de manière stable et s'assemblent au locus cible dans la région promotrice proximale en amont du site de départ de la transcription SOX4, où VP64, p65 et HSF1 agissent de manière coopérative pour recruter l'appareil transcriptionnel endogène et induire une régulation à la hausse soutenue de l'expression endogène de Sox-4. L'utilisation de dCas9 inactif sur les nucléases évite l'introduction de cassures double brin de l'ADN et préserve le locus génomique natif SOX4 ainsi que l'architecture régulatrice.

Le format lentiviral offre plusieurs avantages pratiques : l'intégration génomique stable permet une activation héréditaire au fil des divisions cellulaires ; les préparations de particules à titre élevé éliminent le besoin d'une production virale en interne ; et la compatibilité avec les types de cellules primaires, non divisibles et résistantes à la transfection élargit l'accessibilité expérimentale. Le succès de la transduction peut être confirmé et renforcé par une triple sélection antibiotique utilisant la puromycine, l'hygromycine et la blasticidine.

Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.