Plásmido Doble Nickase (h) Sox-4: sc-401217-NIC
- Especies Diana: human
- 20 µg de plásmido de ADN purificado listo para la trasfección; suficiente para 20 transfecciones máximo
- El Plásmido Double Nickase (h)Sox-4 consisten en un par de plásmidos cada uno codificando una nucleasa Cas9 mutada D10A y una guia de ARN de 20 nucleótidos (gRNA) diseñados para una mayor especificidad que el homologo CRISPR/Cas9 KO
- Las secuencias de gRNA tienen una diferencia de unas 20 pb para permitir un corte doble mediado por Cas9 en el ADN que imita el doble corte
- Uno de los plásmidos contiene el gen de resistencia a puromicina para la selección y el otro el marcado GFP para confirmar visualmente la transfección
- El plásmido de doble nickasa Sox-4 (h) y el plásmido de doble nickasa Sox-4 (h2) codifican diseños distintos de pares de gRNA dirigidos a SOX4. Puede que esté disponible uno o ambos diseños
- Tras la transfección, la eficacia del knockout puede comprobarse mediante WB, IF ó IHC utilzando el anticuerpo: Sox-4 Anticuerpo (B-7): sc-518016
Información sobre pedidos
| Nombre del producto | Número de catálogo | UNIDAD | Precio | CANTIDAD | Favoritos | |
Plásmido Doble Nickase (h) Sox-4 | sc-401217-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plásmido Doble Nickase (h2) Sox-4 | sc-401217-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
SOX4 codifica el factor de transcripción Sox-4, miembro de la familia HMG-box relacionada con SRY, que se une al ADN para regular la especificación de linajes, la diferenciación y las decisiones de destino celular. En células humanas, Sox-4 integra programas del desarrollo con vías de señalización como Wnt/β-catenina, TGF-β/SMAD y Notch, influyendo en redes transcripcionales que controlan la proliferación y la transición epitelio‑mesenquimal. La expresión desregulada de SOX4 se ha asociado con estados de diferenciación alterados y programas transcripcionales oncogénicos en múltiples tipos tumorales, así como con fenotipos del neurodesarrollo y relacionados con el sistema inmunitario. Estas características hacen de SOX4 un nodo útil para estudiar el control transcripcional dependiente del contexto, las transiciones del estado de la cromatina y la comunicación cruzada entre vías en modelos relevantes para enfermedades.
Sox-4 El plásmido de doble nicasa (h) consiste en un par de plásmidos emparejados diseñados para la edición de alta especificidad del locus SOX4 en líneas celulares human. Cada plásmido expresa una nicasa Cas9 D10A y un ARN guía específico (sgRNA) dirigido a cadenas de ADN opuestas dentro de SOX4. Cuando se dirigen a sitios adyacentes en cadenas de ADN opuestas, las dos nicasas generan cortes en cadena simple desplazados que, juntos, producen una rotura de doble cadena escalonada, lo que requiere una actividad coordinada sobre el objetivo por parte de ambas guías. La rotura de ADN resultante se resuelve mediante vías de reparación celular endógenas, más comúnmente a través de la unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que da lugar a inserciones o deleciones que alteran la función de SOX4. Al requerir la participación de dos ARN guía en el locus diana, el enfoque de doble corte mejora la especificidad de la edición y proporciona una estrategia CRISPR complementaria para aplicaciones en las que se desea un control adicional sobre la precisión de la orientación.
Para facilitar la identificación eficiente de las células editadas, un plásmido codifica GFP para la visualización fluorescente de las poblaciones transfectadas, mientras que el plásmido complementario lleva un gen de resistencia a la puromicina para la selección con antibióticos. En conjunto, estas características facilitan el enriquecimiento eficiente de las poblaciones cotransfectadas y simplifican la validación de los clones con SOX4 alterado.
Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.