SerpinB1 Plasmídeo duplo de Nickase (h): sc-402083-NIC

SERPINB1 codifica a SerpinB1, um inibidor intracelular de proteases serinas que restringe proteases derivadas de neutrófilos, como a elastase e a catepsina G, limitando assim o estresse proteolítico e sustentando a homeostase tecidual. A SerpinB1 contribui para a regulação da sinalização inflamatória, da sobrevivência de leucócitos e da integridade da barreira epitelial ao modular vias dependentes de proteases ligadas ao estresse oxidativo e à morte celular. Alterações na expressão ou na função de SERPINB1 têm sido associadas a respostas imunes inatas desreguladas e a desequilíbrio de proteases em contextos inflamatórios das vias aéreas e da pele, e o gene também é usado como marcador em estudos sobre estados de células mieloides. Essas características tornam o SERPINB1 um alvo útil para dissecar redes de protease-inibidor, a biologia de neutrófilos e mecanismos de remodelamento associados à inflamação em modelos celulares humanos.

SerpinB1 O Plasmídeo de Nickase Dupla (h) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus SERPINB1 em linhas celulares human. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de SERPINB1. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função SERPINB1. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.

Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com SERPINB1 interrompido.

Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.