Septin 14 CRISPR/Cas9 케이오 플라스미드 (h): sc-406949

개요

SEPT14는 이질(헤테로) 올리고머성 필라멘트와 더 높은 차원의 고리 구조로 조립되는 GTP 결합 세포골격 단백질인 셉틴(septin) 패밀리의 일원인 셉틴 14를 암호화합니다. 셉틴 14는 액틴–미세소관 인터페이스의 조직화, 막 리모델링, 그리고 세포질분열(cytokinesis)·세포 극성·소포 수송을 지지하는 확산 장벽의 형성에 기여합니다. 또한 셉틴 의존적 스캐폴딩은 피질(cortex)에서 신호전달과 단백질 구획화를 조정하여, 세포골격 역학을 세포주기 진행과 연결합니다. 셉틴의 발현 또는 필라멘트 조직이 조절 이상을 보이면 질환 관련 맥락에서 증식과 세포 구조가 변화하는 것과 연관되어 왔으며, 이는 세포골격 기능 이상 기전에서 SEPT14를 연구할 필요성을 뒷받침합니다.

Septin 14 CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (h)는 human 세포주에서 SEPT14 유전자의 표적 파괴를 위해 설계된 플라스미드 풀입니다. 각 플라스미드는 SEPT14 유전자 내의 서로 다른 부위를 표적으로 하는 고유한 단일 가이드 RNA(sgRNA)와 Streptococcus pyogenes Cas9 뉴클레아제를 함께 발현합니다. 또한 이 플라스미드들은 GFP를 암호화하여, 형광 현미경이나 유세포 분석기를 통해 성공적으로 형질전환된 세포를 형광으로 식별하고 농축할 수 있게 합니다.

다중 가이드 설계는 Cas9에 의한 이중 가닥 절단 형성 후 SEPT14의 개방 독서 틀(ORF)을 파괴하는 삽입 또는 결실(indel)이 발생할 가능성을 높입니다. CRISPR/Cas9 시스템에 의해 유발된 DNA 절단은 내인성 비동종 말단 결합(NHEJ) 경로를 통해 복구되며, 이는 종종 Septin 14 단백질 발현을 소멸시키는 프레임 시프트 돌연변이를 초래합니다.

이 CRISPR 녹아웃 시스템은 Septin 14 신호 전달 연구, 기능 유전체학 연구, 암 생물학 연구 및 인간 세포주에서의 치료 반응 평가를 위한 SEPT14 결핍 세포 모델을 효율적으로 생성할 수 있게 합니다.

주요 특징

• Septin 14 기능에 중요한 SEPT14 엑손을 표적하는 sgRNA
  전달을 단순화하기 위해 단일 플라스미드에서 SpCas9 및 sgRNA의 공동 발현
  형질전환된 세포 식별을 위한 GFP 리포터
  녹아웃 효율 향상을 위해 여러 SEPT14 게놈 부위를 표적하는 플라스미드 풀
  형질전환을 통한 전달과 호환

설계 변형

CRISPRs +/- HDR

• Septin 14 CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (h) 및 Septin 14 CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (h2)에 의해 암호화되는 gRNA는 SEPT14 유전자좌 내의 서로 다른 부위를 표적화합니다. 표적화 설계 중 하나 또는 둘 다 이용 가능할 수 있습니다. 구입 가능 여부는 관련 제품을 참조하십시오.
  Septin 14 HDR 플라스미드 (h) 및 Septin 14 HDR 플라스미드 (h2)에 의해 암호화되는
  HDR 기증자 컨스트럭트는 푸로마이신 내성 카세트와 RFP 리포터를 포함하며, 이는 CRISPR/Cas9 KO 설계에 해당하는 정의된 SEPT14 표적 부위에서의 상동성 유도 복구를 지원하기 위해 SEPT14 상동성 암으로 둘러싸여 있습니다. HDR 기증자의 재고 여부는 달라질 수 있습니다. 재고 여부는 관련 제품을 참조하십시오.

연구용으로만 사용하세요. 진단 또는 치료용이 아닙니다.