SEMA5A CRISPR/Cas9 케이오 플라스미드 (m): sc-422885

개요

Sema5a는 세포막을 관통하는 유도 신호 단서인 SEMA5A를 암호화하며, SEMA5A는 세마포린(semaphorin) 계열에 속하는 단백질로서 세포골격을 재구성하는 수용체 매개 신호전달을 통해 축삭 경로 탐색(axon pathfinding), 신경세포 이동, 시냅스 형성을 조절합니다. 신경계에서의 역할 외에도 SEMA5A는 여러 조직에서 세포 부착과 운동성 프로그램에 기여하며, 방향성 이동과 조직 패터닝을 형성하는 경로들과 교차합니다. SEMA5A의 발현 또는 신호전달의 변화는 신경발달 관련 표현형과 연관되어 왔으며, 비정상적 연결성 및 염증성 미세환경이 관여하는 맥락에서 연구되어 왔습니다. 마우스 모델에서는 Sema5a 교란을 통해 회로 조립(circuit assembly)의 기전을 규명하고, 발달 및 질병 관련 과정 동안 유도 신호전달을 세포 상태 변화와 연결하는 데 활용됩니다.

SEMA5A CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (m)는 mouse 세포주에서 Sema5a 유전자의 표적 파괴를 위해 설계된 플라스미드 풀입니다. 각 플라스미드는 Sema5a 유전자 내의 서로 다른 부위를 표적으로 하는 고유한 단일 가이드 RNA(sgRNA)와 Streptococcus pyogenes Cas9 뉴클레아제를 함께 발현합니다. 또한 이 플라스미드들은 GFP를 암호화하여, 형광 현미경이나 유세포 분석기를 통해 성공적으로 형질전환된 세포를 형광으로 식별하고 농축할 수 있게 합니다.

다중 가이드 설계는 Cas9에 의한 이중 가닥 절단 형성 후 Sema5a의 개방 독서 틀(ORF)을 파괴하는 삽입 또는 결실(indel)이 발생할 가능성을 높입니다. CRISPR/Cas9 시스템에 의해 유발된 DNA 절단은 내인성 비동종 말단 결합(NHEJ) 경로를 통해 복구되며, 이는 종종 SEMA5A 단백질 발현을 소멸시키는 프레임 시프트 돌연변이를 초래합니다.

이 CRISPR 녹아웃 시스템은 SEMA5A 신호 전달 연구, 기능 유전체학 연구, 암 생물학 연구 및 인간 세포주에서의 치료 반응 평가를 위한 Sema5a 결핍 세포 모델을 효율적으로 생성할 수 있게 합니다.

주요 특징

• SEMA5A 기능에 중요한 Sema5a 엑손을 표적하는 sgRNA
  전달을 단순화하기 위해 단일 플라스미드에서 SpCas9 및 sgRNA의 공동 발현
  형질전환된 세포 식별을 위한 GFP 리포터
  녹아웃 효율 향상을 위해 여러 Sema5a 게놈 부위를 표적하는 플라스미드 풀
  형질전환을 통한 전달과 호환

설계 변형

CRISPRs +/- HDR

• SEMA5A CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (m) 및 SEMA5A CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (m2)에 의해 암호화되는 gRNA는 Sema5a 유전자좌 내의 서로 다른 부위를 표적화합니다. 표적화 설계 중 하나 또는 둘 다 이용 가능할 수 있습니다. 구입 가능 여부는 관련 제품을 참조하십시오.
  SEMA5A HDR 플라스미드 (m) 및 SEMA5A HDR 플라스미드 (m2)에 의해 암호화되는
  HDR 기증자 컨스트럭트는 푸로마이신 내성 카세트와 RFP 리포터를 포함하며, 이는 CRISPR/Cas9 KO 설계에 해당하는 정의된 Sema5a 표적 부위에서의 상동성 유도 복구를 지원하기 위해 Sema5a 상동성 암으로 둘러싸여 있습니다. HDR 기증자의 재고 여부는 달라질 수 있습니다. 재고 여부는 관련 제품을 참조하십시오.

연구용으로만 사용하세요. 진단 또는 치료용이 아닙니다.