SEMA3G CRISPR/Cas9 KOプラスミド (h): sc-406077

概要

SEMA3Gは、分泌型のガイダンス因子であるセマフォリン3Gをコードしており、ニューロピリン／プレキシン受容体複合体を介してシグナルを伝達し、細胞骨格の再編成、細胞移動、組織パターニングを制御します。軸索誘導や神経発生における役割に加えて、SEMA3Gは血管新生およびリンパ管のスプラウティングにも影響し、セマフォリン依存的シグナル伝達を通じて内皮細胞や免疫細胞の挙動を調節し得ます。これらの過程は、接着、運動性、血管リモデリングを制御する経路と交差するため、SEMA3Gは発生生物学や微小環境に駆動される細胞運動の制御を研究するうえで重要な結節点となります。セマフォリンシグナルの異常は、がんの進展や転移関連表現型、ならびに血管機能障害や炎症性の機能不全と関連づけられており、疾患関連モデルにおけるSEMA3Gの検討を支持します。

SEMA3G CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h）は、human細胞株におけるSEMA3G遺伝子の標的破壊を目的として設計されたプラスミドのプールである。各プラスミドは、SEMA3G内の異なる部位を標的とする固有のシングルガイドRNA（sgRNA）と、Streptococcus pyogenes由来のCas9ヌクレアーゼを共発現します。また、これらのプラスミドはGFPをコードしており、蛍光顕微鏡やフローサイトメトリーを用いて、トランスフェクションに成功した細胞を蛍光で識別・濃縮することが可能です。

このマルチガイド設計により、Cas9による二本鎖切断の形成後に、SEMA3Gのオープンリーディングフレームを破壊する挿入または欠失（インデル）が生じる可能性が高まります。CRISPR/Cas9システムによって導入されたDNA切断は、内因性の非相同末端結合（NHEJ）経路を通じて修復され、その結果、SEMA3Gタンパク質の発現を阻害するフレームシフト変異が生じることが頻繁にあります。

このCRISPRノックアウトシステムにより、SEMA3Gシグナル伝達、機能ゲノミクス研究、がん生物学研究、およびヒト細胞株における治療反応の評価を目的とした、SEMA3G欠損細胞モデルの効率的な作製が可能となる。

主な特徴

• SEMA3Gの機能に不可欠なSEMA3Gエクソンを標的とするsgRNA
  導入を簡素化するための、単一プラスミドからのSpCas9およびsgRNAの共発現
  トランスフェクトされた細胞を識別するためのGFPレポーター
  ノックアウト効率を向上させるための、SEMA3Gゲノム上の複数の部位を標的とするプラスミドのプール
  トランスフェクションによる導入に対応

設計バリエーション

CRISPRs +/- HDR

• SEMA3G CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h）およびSEMA3G CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h2）によってコードされるgRNAは、SEMA3G遺伝子座内の異なる部位を標的としています。いずれか一方、または両方の標的設計が利用可能な場合があります。入手可能性については「関連製品」を参照してください。
  SEMA3G HDRプラスミド（h）および SEMA3G HDRプラスミド（h2）によってコードされるHDRドナー構築体は、プロマイシン耐性カセットとRFPレポーターを含み、これらはSEMA3Gホモロジーアームに挟まれており、CRISPR/Cas9 KO設計に対応する特定のSEMA3G標的部位でのホモロジー依存修復をサポートします。HDRドナーの入手可能性は異なる場合があります。入手可能性については「関連製品」をご確認ください。

研究用のみ。診断用または治療用ではありません。