SEMA3C Double Nickase Plasmid (m): sc-422877-NIC
- Zielspezies: mouse
- 20 µg transfektionsfertige, aufgereinigte Plasmid DNA; geeignet für 20 Transfektionen
- Das SEMA3C Double Nickase Plasmid (m) wird als Plasmid-Paar geliefert. Die einzelnen Plasmide kodieren für eine D10A mutierte Cas9 Nuklease sowie für je eine unterschiedliche, zielspezifische 20nt guide RNA (gRNA) Sequenz. Dies erlaubt eine hohe Knockout-Effizienz bei gleichzeitig größerer Spezifität als das entsprechende CRISPR/Cas9 KO Plasmid
- gRNA Sequenzpaare liegen ca. 20 bp auseinander um ein spezifisches Cas9-vermitteltes "Double Nicking" der genomischen DNA zu erlauben und so im Resultat den Effekt eines Doppelstrangbruchs nachzuahmen.
- Ein Plasmid kodiert für ein Puromycin-Resistenzgen zur Selektion von stabilen Knockout-Zellen. Das andere Plasmid kodiert für ein GFP-Gen für den visuellen Nachweis der Transfektion
- SEMA3C Double-Nickase-Plasmid (m) und SEMA3C Double-Nickase-Plasmid (m2) kodieren unterschiedliche gepaarte gRNA-Designs, die auf Sema3c abzielen. Möglicherweise ist eines oder sind beide Designs verfügbar
Bestellinformation
| Produkt | Katalog # | EINHEIT | Preis | ANZAHL | Favoriten | |
SEMA3C Double Nickase Plasmid (m) | sc-422877-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
SEMA3C Double Nickase Plasmid (m2) | sc-422877-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
Das Mausgen **Sema3c** kodiert **SEMA3C**, ein sezerniertes Semaphorin der Klasse 3, das als Leitsignal wirkt und die Umgestaltung des Zytoskeletts, Zellmigration und Gewebemusterbildung reguliert. SEMA3C signalisiert vor allem über Neuropilin- und Plexin-Rezeptorkomplexe, um Rho-Familien-GTPasen und nachgeschaltete Signalwege zu modulieren, die Adhäsion und gerichtete Bewegung beeinflussen. Während der Entwicklung trägt es zur Axonleitbahnfindung und zur kardiovaskulären Morphogenese bei, und fehlregulierte Semaphorin-Signale werden häufig im Zusammenhang mit abnormalem vaskulärem Remodeling und invasivem Zellverhalten untersucht. Als Ligand des Mikromilieus wird SEMA3C außerdem hinsichtlich seiner Rollen bei epithelial-mesenchymalen Transitionen und der interzellulären Kommunikation in krankheitsrelevanten Modellen erforscht.
SEMA3C Das Double-Nickase-Plasmid (m) besteht aus einem aufeinander abgestimmten Plasmidpaar, das für die hochspezifische Bearbeitung des Sema3c-Lokus in mouse-Zelllinien entwickelt wurde. Jedes Plasmid exprimiert eine Cas9-D10A-Nickase und eine spezifische sgRNA, die auf entgegengesetzte DNA-Stränge innerhalb von Sema3c abzielt. Wenn sie auf benachbarte Stellen auf entgegengesetzten DNA-Strängen gerichtet sind, erzeugen die beiden Nickasen versetzte Einzelstrang-Schnitte, die zusammen einen versetzten Doppelstrangbruch erzeugen, was eine koordinierte On-Target-Aktivität beider Guides erfordert. Der resultierende DNA-Bruch wird durch endogene zelluläre Reparaturwege behoben, meist durch nicht-homologe Endverknüpfung (NHEJ), was zu Insertionen oder Deletionen führt, die die Sema3c-Funktion stören. Durch die Notwendigkeit einer doppelten sgRNA-Bindung am Zielort erhöht der Doppel-Nick-Ansatz die Spezifität der Bearbeitung und bietet eine komplementäre CRISPR-Strategie für Anwendungen, bei denen eine zusätzliche Kontrolle über die Zielgenauigkeit gewünscht ist.
Um eine effiziente Identifizierung editierter Zellen zu unterstützen, kodiert ein Plasmid GFP zur fluoreszierenden Visualisierung transfizierter Populationen, während das Begleitplasmid ein Puromycin-Resistenzgen für die Antibiotika-Selektion trägt. Zusammen unterstützen diese Merkmale eine effiziente Anreicherung co-transfizierter Populationen und vereinfachen die Validierung von Klonen mit Sema3c-Störung.
Nur für Forschungszwecke. Nicht für diagnostische oder therapeutische Zwecke bestimmt.