Scratch1 CRISPR/Cas9 케이오 플라스미드 (h): sc-410173

개요

SCRT1은 신경 계통에서 주로 전사 억제자로 작용하는 아연 손가락 전사인자인 Scratch1을 암호화하며, 신경세포의 분화, 이동, 성숙 프로그램을 조율하는 데 도움을 줍니다. Scratch1은 발달 과정에서 세포 상태 전환과 세포골격 역학을 형성하는 유전자 조절 네트워크 안에서 기능하며, proneural bHLH 인자 및 EMT(상피-간엽 전이) 관련 전사 조절과 교차합니다. 계통 특이적 유전자 발현을 조절하고 비신경성 프로그램을 억제함으로써, SCRT1은 신경세포 정체성의 유지와 상황(맥락)에 따른 증식 조절에 기여합니다. SCRT1과 연관된 전사 프로그램의 이상 조절은 신경발달 관련 표현형과, 발달 조절 인자들이 분화 상태와 침습성에 영향을 주도록 재활용되는 경우가 흔한 암 생물학 분야에서 연구되어 왔습니다.

Scratch1 CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (h)는 human 세포주에서 SCRT1 유전자의 표적 파괴를 위해 설계된 플라스미드 풀입니다. 각 플라스미드는 SCRT1 유전자 내의 서로 다른 부위를 표적으로 하는 고유한 단일 가이드 RNA(sgRNA)와 Streptococcus pyogenes Cas9 뉴클레아제를 함께 발현합니다. 또한 이 플라스미드들은 GFP를 암호화하여, 형광 현미경이나 유세포 분석기를 통해 성공적으로 형질전환된 세포를 형광으로 식별하고 농축할 수 있게 합니다.

다중 가이드 설계는 Cas9에 의한 이중 가닥 절단 형성 후 SCRT1의 개방 독서 틀(ORF)을 파괴하는 삽입 또는 결실(indel)이 발생할 가능성을 높입니다. CRISPR/Cas9 시스템에 의해 유발된 DNA 절단은 내인성 비동종 말단 결합(NHEJ) 경로를 통해 복구되며, 이는 종종 Scratch1 단백질 발현을 소멸시키는 프레임 시프트 돌연변이를 초래합니다.

이 CRISPR 녹아웃 시스템은 Scratch1 신호 전달 연구, 기능 유전체학 연구, 암 생물학 연구 및 인간 세포주에서의 치료 반응 평가를 위한 SCRT1 결핍 세포 모델을 효율적으로 생성할 수 있게 합니다.

주요 특징

• Scratch1 기능에 중요한 SCRT1 엑손을 표적하는 sgRNA
  전달을 단순화하기 위해 단일 플라스미드에서 SpCas9 및 sgRNA의 공동 발현
  형질전환된 세포 식별을 위한 GFP 리포터
  녹아웃 효율 향상을 위해 여러 SCRT1 게놈 부위를 표적하는 플라스미드 풀
  형질전환을 통한 전달과 호환

설계 변형

CRISPRs +/- HDR

• Scratch1 CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (h) 및 Scratch1 CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (h2)에 의해 암호화되는 gRNA는 SCRT1 유전자좌 내의 서로 다른 부위를 표적화합니다. 표적화 설계 중 하나 또는 둘 다 이용 가능할 수 있습니다. 구입 가능 여부는 관련 제품을 참조하십시오.
  Scratch1 HDR 플라스미드 (h) 및 Scratch1 HDR 플라스미드 (h2)에 의해 암호화되는
  HDR 기증자 컨스트럭트는 푸로마이신 내성 카세트와 RFP 리포터를 포함하며, 이는 CRISPR/Cas9 KO 설계에 해당하는 정의된 SCRT1 표적 부위에서의 상동성 유도 복구를 지원하기 위해 SCRT1 상동성 암으로 둘러싸여 있습니다. HDR 기증자의 재고 여부는 달라질 수 있습니다. 재고 여부는 관련 제품을 참조하십시오.

연구용으로만 사용하세요. 진단 또는 치료용이 아닙니다.