Plásmido Doble Nickase (h) ROR1: sc-401841-NIC
- Especies Diana: human
- 20 µg de plásmido de ADN purificado listo para la trasfección; suficiente para 20 transfecciones máximo
- El Plásmido Double Nickase (h)ROR1 consisten en un par de plásmidos cada uno codificando una nucleasa Cas9 mutada D10A y una guia de ARN de 20 nucleótidos (gRNA) diseñados para una mayor especificidad que el homologo CRISPR/Cas9 KO
- Las secuencias de gRNA tienen una diferencia de unas 20 pb para permitir un corte doble mediado por Cas9 en el ADN que imita el doble corte
- Uno de los plásmidos contiene el gen de resistencia a puromicina para la selección y el otro el marcado GFP para confirmar visualmente la transfección
- El plásmido de doble nickasa ROR1 (h) y el plásmido de doble nickasa ROR1 (h2) codifican diseños distintos de pares de gRNA dirigidos a ROR1. Puede que esté disponible uno o ambos diseños
- Tras la transfección, la eficacia del knockout puede comprobarse mediante WB, IF ó IHC utilzando el anticuerpo: ROR1 Anticuerpo (60-D): sc-130386
Información sobre pedidos
| Nombre del producto | Número de catálogo | UNIDAD | Precio | CANTIDAD | Favoritos | |
Plásmido Doble Nickase (h) ROR1 | sc-401841-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plásmido Doble Nickase (h2) ROR1 | sc-401841-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
ROR1 (receptor huérfano 1 similar a una tirosina quinasa) codifica un receptor transmembrana de paso único de la familia ROR que participa en la señalización Wnt no canónica, incluidas respuestas dependientes de ligando a WNT5A. ROR1 modula la polaridad celular, la migración, la remodelación del citoesqueleto y programas de supervivencia mediante el entrecruzamiento de vías que involucran GTPasas de la familia Rho, PI3K/AKT, MAPK y nodos de señalización asociados a NF-κB. Aunque su expresión está estrechamente regulada durante el desarrollo, la expresión y señalización aberrantes de ROR1 se han asociado con estados de diferenciación alterados y fenotipos invasivos en múltiples contextos de enfermedad. Estas propiedades hacen de ROR1 una diana útil para investigar la arquitectura de la vía Wnt, la señalización proximal al receptor y los mecanismos que gobiernan la motilidad y la plasticidad del estado celular.
ROR1 El plásmido de doble nicasa (h) consiste en un par de plásmidos emparejados diseñados para la edición de alta especificidad del locus ROR1 en líneas celulares human. Cada plásmido expresa una nicasa Cas9 D10A y un ARN guía específico (sgRNA) dirigido a cadenas de ADN opuestas dentro de ROR1. Cuando se dirigen a sitios adyacentes en cadenas de ADN opuestas, las dos nicasas generan cortes en cadena simple desplazados que, juntos, producen una rotura de doble cadena escalonada, lo que requiere una actividad coordinada sobre el objetivo por parte de ambas guías. La rotura de ADN resultante se resuelve mediante vías de reparación celular endógenas, más comúnmente a través de la unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que da lugar a inserciones o deleciones que alteran la función de ROR1. Al requerir la participación de dos ARN guía en el locus diana, el enfoque de doble corte mejora la especificidad de la edición y proporciona una estrategia CRISPR complementaria para aplicaciones en las que se desea un control adicional sobre la precisión de la orientación.
Para facilitar la identificación eficiente de las células editadas, un plásmido codifica GFP para la visualización fluorescente de las poblaciones transfectadas, mientras que el plásmido complementario lleva un gen de resistencia a la puromicina para la selección con antibióticos. En conjunto, estas características facilitan el enriquecimiento eficiente de las poblaciones cotransfectadas y simplifican la validación de los clones con ROR1 alterado.
Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.