RNF40 CRISPR/Cas9 케이오 플라스미드 (h): sc-404156

개요

RNF40는 RNF20과 필수적(의무적) 이형이합체(heterodimer)를 형성하여 히스톤 H2B를 단일 유비퀴틴화(H2BK120ub)하는 RING finger E3 유비퀴틴 리가아제를 암호화합니다. H2BK120ub는 전사 신장 과정과 H3K4 및 H3K79 메틸화로의 후성유전적 상호작용을 연결하는 핵심 크로마틴 변형입니다. 이러한 활성을 통해 RNF40는 RNA 중합효소 II 의존적 유전자 발현 프로그램, 크로마틴 접근성, 그리고 복제 스트레스나 이중가닥 절단 부위에서의 크로마틴 리모델링에 의존하는 조정된 DNA 손상 반응을 조절합니다. RNF40 의존적 H2B 유비퀴틴화는 세포주기 조절과 계통(라인리지) 특이적 전사 네트워크에도 영향을 미치므로, 암 및 기타 증식성 질환에서 관찰되는 유전체 안정성과 비정상적 전사를 연구하는 데 중요한 표적입니다. RNF40 신호의 변화는 또한 상황(컨텍스트) 의존적인 인핸서 및 프로모터 기능 조절을 통해 염증 및 발달 경로의 변화와도 연관되어 있습니다.

RNF40 CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (h)는 human 세포주에서 RNF40 유전자의 표적 파괴를 위해 설계된 플라스미드 풀입니다. 각 플라스미드는 RNF40 유전자 내의 서로 다른 부위를 표적으로 하는 고유한 단일 가이드 RNA(sgRNA)와 Streptococcus pyogenes Cas9 뉴클레아제를 함께 발현합니다. 또한 이 플라스미드들은 GFP를 암호화하여, 형광 현미경이나 유세포 분석기를 통해 성공적으로 형질전환된 세포를 형광으로 식별하고 농축할 수 있게 합니다.

다중 가이드 설계는 Cas9에 의한 이중 가닥 절단 형성 후 RNF40의 개방 독서 틀(ORF)을 파괴하는 삽입 또는 결실(indel)이 발생할 가능성을 높입니다. CRISPR/Cas9 시스템에 의해 유발된 DNA 절단은 내인성 비동종 말단 결합(NHEJ) 경로를 통해 복구되며, 이는 종종 RNF40 단백질 발현을 소멸시키는 프레임 시프트 돌연변이를 초래합니다.

이 CRISPR 녹아웃 시스템은 RNF40 신호 전달 연구, 기능 유전체학 연구, 암 생물학 연구 및 인간 세포주에서의 치료 반응 평가를 위한 RNF40 결핍 세포 모델을 효율적으로 생성할 수 있게 합니다.

주요 특징

• RNF40 기능에 중요한 RNF40 엑손을 표적하는 sgRNA
  전달을 단순화하기 위해 단일 플라스미드에서 SpCas9 및 sgRNA의 공동 발현
  형질전환된 세포 식별을 위한 GFP 리포터
  녹아웃 효율 향상을 위해 여러 RNF40 게놈 부위를 표적하는 플라스미드 풀
  형질전환을 통한 전달과 호환

설계 변형

CRISPRs +/- HDR

• RNF40 CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (h) 및 RNF40 CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (h2)에 의해 암호화되는 gRNA는 RNF40 유전자좌 내의 서로 다른 부위를 표적화합니다. 표적화 설계 중 하나 또는 둘 다 이용 가능할 수 있습니다. 구입 가능 여부는 관련 제품을 참조하십시오.
  RNF40 HDR 플라스미드 (h) 및 RNF40 HDR 플라스미드 (h2)에 의해 암호화되는
  HDR 기증자 컨스트럭트는 푸로마이신 내성 카세트와 RFP 리포터를 포함하며, 이는 CRISPR/Cas9 KO 설계에 해당하는 정의된 RNF40 표적 부위에서의 상동성 유도 복구를 지원하기 위해 RNF40 상동성 암으로 둘러싸여 있습니다. HDR 기증자의 재고 여부는 달라질 수 있습니다. 재고 여부는 관련 제품을 참조하십시오.

연구용으로만 사용하세요. 진단 또는 치료용이 아닙니다.