RNF145 Plasmídeo duplo de Nickase (h): sc-416912-NIC
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- RNF145O plasmídeo de dupla Nickase (h) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase RNF145 (h) e o Plasmídeo Double Nickase RNF145 (h2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para RNF145. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
RNF145 Plasmídeo duplo de Nickase (h) | sc-416912-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
RNF145 Plasmídeo duplo de Nickase (h2) | sc-416912-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
RNF145 codifica uma ligase E3 de ubiquitina do tipo RING finger, multipasso, localizada na membrana do retículo endoplasmático (RE), que ajuda a controlar a homeostase celular de colesterol e lipídios ao regular a estabilidade de enzimas biossintéticas-chave. Como fator de ubiquitinação associado ao RE, a RNF145 integra-se ao sistema ubiquitina–proteassoma e a programas de retroalimentação sensíveis a esteróis para ajustar finamente o fluxo da via do mevalonato e a composição lipídica de membrana. Essa regulação sustenta processos mais amplos, incluindo controle de qualidade do RE, adaptação metabólica e sinalização de estresse ligada à proteostase. A desregulação do metabolismo de esteróis e da proteostase do RE é comumente implicada na biologia de doenças cardiometabólicas e proliferativas, tornando a RNF145 um alvo útil para estudos mecanísticos de fenótipos impulsionados por lipídios.
RNF145 O Plasmídeo de Nickase Dupla (h) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus RNF145 em linhas celulares human. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de RNF145. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função RNF145. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com RNF145 interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.