Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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Plasmide CRISPR/Cas9 KO RFXAP (h): sc-406793
- Espèces cibles: human
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- RFXAP Le plasmide CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (h) est un ensemble de plasmides, chacun codant pour la nucléase Cas9 et un ARN guide (gRNA) de 20 nt spécifique à la cible, conçu pour une efficacité de knockout maximale à l'aide de séquences issues de la bibliothèque GeCKO v2
- Les séquences d'ARN guide (gRNA) dirigent Cas9 pour induire des cassures double brin (DSB) spécifiques au site dans le locus génomique RFXAP, entraînant un knock-out génique par jonction non homologue (NHEJ)
- Les gènes de résistance à la puromycine et RFP sont flanqués de sites LoxP, permettant la suppression des marqueurs de sélection via la recombinase Cre (Cre Vector : sc-418923) après l'établissement de lignées cellulaires knock-out stables
- Après transfection, l'efficacité de knockout de gène peut être évaluée par WB, IF ou IHC en utilisant l'anticorps: RFXAP Antibody (RFXAD55A): sc-81368
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide CRISPR/Cas9 KO RFXAP (h) | sc-406793 | 20 µg | $397.00 |
Présentation
RFXAP (regulatory factor X associated protein) est un cofacteur essentiel du complexe transcriptionnel RFX, qui se lie à l’élément promoteur X-box afin d’induire l’expression des gènes du CMH (MHC) de classe II. Par ce rôle, RFXAP soutient le traitement et la présentation des antigènes et module l’activation de l’immunité adaptative en régulant des programmes transcriptionnels dépendants de CIITA. Les variants avec perte de fonction de RFXAP perturbent l’expression du CMH de classe II et sont associés au syndrome des lymphocytes nus (bare lymphocyte syndrome) de type II, caractérisé par une surveillance immunitaire défectueuse. Dans des systèmes modèles, la perturbation de RFXAP affecte les voies sensibles aux interférons, la différenciation des cellules immunitaires et les mécanismes qui gouvernent les interactions hôte–pathogène.
Le plasmide CRISPR/Cas9 KO RFXAP (h) est un ensemble de plasmides conçus pour la disruption ciblée du gène RFXAP dans les lignées cellulaires human. Chaque plasmide co-exprime un ARN guide unique (sgRNA) ciblant un site distinct au sein du RFXAP, ainsi que la nucléase Cas9 de Streptococcus pyogenes. Les plasmides codent également pour la GFP, ce qui permet l'identification par fluorescence et l'enrichissement des cellules transfectées avec succès par microscopie à fluorescence ou cytométrie en flux.
La conception multi-guide augmente la probabilité de générer des insertions ou des délétions (indels) qui perturbent le cadre de lecture ouvert RFXAP à la suite de la formation de cassures double brin médiées par Cas9. Les cassures d'ADN introduites par le système CRISPR/Cas9 sont réparées par des voies endogènes de jonction non homologue (NHEJ), ce qui entraîne fréquemment des mutations par décalage du cadre de lecture qui suppriment l'expression de la protéine RFXAP.
Ce système de knock-out CRISPR permet la génération efficace de modèles cellulaires déficients en RFXAP pour l'étude de la signalisation de RFXAP, les études de génomique fonctionnelle, la recherche en biologie du cancer et l'évaluation des réponses thérapeutiques dans des lignées cellulaires humaines.
Caractéristiques principales
- sgRNA ciblant le ou les exons de RFXAP essentiels à la fonction de RFXAP
Co-expression de SpCas9 et de sgRNA à partir d'un seul plasmide pour une administration simplifiée
Rapporteur GFP pour l'identification des cellules transfectées
Pool de plasmides ciblant plusieurs sites génomiques de RFXAP pour améliorer l'efficacité du knock-out
Compatible avec l'administration par transfection
Variantes de conception
CRISPR +/- HDR
- Les gRNA codés par le RFXAP plasmide CRISPR/Cas9 KO (h) et le RFXAP plasmide CRISPR/Cas9 KO (h2) ciblent des sites distincts au sein du locus RFXAP. Une ou les deux conceptions de ciblage peuvent être disponibles. Voir les produits associés pour connaître la disponibilité.
Les constructions donneuses HDR codées par le RFXAP plasmide HDR (h) et le RFXAP (h2) contiennent une cassette de résistance à la puromycine et un rapporteur RFP flanqué de bras d'homologie RFXAP pour permettre la réparation dirigée par homologie au niveau de sites cibles RFXAP définis correspondant aux conceptions CRISPR/Cas9 KO. La disponibilité des donneurs HDR peut varier. Voir les produits associés pour connaître la disponibilité.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.