Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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Plasmide Double Nickase (m) RecQL1: sc-422636-NIC
- Espèces cibles: mouse
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- Le Plasmide Double Nickase (m) RecQL1 correspond à une paire de plasmides chacun codant la nucléase Cas9 mutante D10A et un ARN guide (gARN) cible de 20 nt specifique, élaboré pour le knockout optimal de l'expression d'un gène avec une plus grande spécificité que le plasmide KO CRISPR/Cas9 correspondant.
- Les séquences des paires d'ARNg sont décalées de 20 pb environ pour induire avec la Cas9 une double entaille spécifique de l'ADN génomique, qui imite un DSB
- L'un des plasmides de la paire contient un gène de résistance à la puromycine; l'autre plasmide de la paire contient un marqueur GFP pour confirmer visuellement la transfection
- Le plasmide RecQL1 Double Nickase (m) et le plasmide RecQL1 Double Nickase (m2) codent pour des paires distinctes de gRNA ciblant Recql. Un ou les deux modèles peuvent être disponibles
- Après transfection, l'efficacité de knockout de gène peut être évaluée par WB, IF ou IHC en utilisant l'anticorps: RecQL1 Antibody (A-9): sc-166388
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide Double Nickase (m) RecQL1 | sc-422636-NIC | 20 µg | $410.00 |
Recql code l’hélicase d’ADN murine RecQL1, un membre de la famille RecQ qui préserve l’intégrité du génome lors de la réplication et de la réparation de l’ADN. RecQL1 intervient dans la reprise des fourches de réplication, le traitement des structures secondaires de l’ADN et la résolution des intermédiaires de recombinaison, reliant ainsi son activité à la recombinaison homologue et aux réponses au stress réplicatif. Par ses interactions avec des facteurs clés de réparation et des enzymes du métabolisme de l’ADN, RecQL1 contribue à limiter les cassures chromosomiques et les échanges aberrants entre chromatides sœurs. Une altération de la fonction de RecQL1 est associée à des phénotypes d’instabilité génomique largement utilisés pour modéliser des mécanismes pertinents pour la biologie du cancer et d’autres troubles dus à des réponses défectueuses aux dommages de l’ADN.
RecQL1 Le plasmide double nickase (m) se compose d'une paire de plasmides appariés, conçus pour une édition hautement spécifique du locus Recql dans les lignées cellulaires mouse. Chaque plasmide exprime une nickase Cas9 D10A et un sgRNA distinct ciblant des brins d'ADN opposés au sein de Recql. Lorsqu'elles sont dirigées vers des sites adjacents sur des brins d'ADN opposés, les deux nickases génèrent des cassures simple brin décalées qui, ensemble, produisent une cassure double brin décalée, nécessitant une activité coordonnée sur la cible de la part des deux guides. La cassure d'ADN qui en résulte est résolue par les voies de réparation cellulaires endogènes, le plus souvent par jonction non homologue (NHEJ), ce qui conduit à des insertions ou des délétions qui perturbent la fonction de Recql. En nécessitant l'engagement de deux ARNsg au locus cible, l'approche par double nick améliore la spécificité de l'édition et offre une stratégie CRISPR complémentaire pour les applications où un contrôle supplémentaire de la précision du ciblage est souhaité.
Afin de faciliter l'identification efficace des cellules éditées, un plasmide code pour la GFP permettant la visualisation par fluorescence des populations transfectées, tandis que le plasmide compagnon porte un gène de résistance à la puromycine pour la sélection antibiotique. Ensemble, ces caractéristiques favorisent l'enrichissement efficace des populations co-transfectées et simplifient la validation des clones présentant une perturbation de Recql.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.