Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
Rab 34 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h): sc-406606
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- Rab 34 O Plasmídeo CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (h) é um conjunto de plasmídeos, cada um codificando a nuclease Cas9 e um RNA guia (gRNA) de 20 nt específico para o alvo, concebido para uma eficiência máxima de knockout utilizando sequências derivadas da biblioteca GeCKO v2
- As sequências de gRNA direcionam a Cas9 para induzir quebras de cadeia dupla (DSBs) específicas do local no locus genómico Rab 34, resultando no knockout do gene através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ)
- Os genes de resistência à puromicina e RFP são flanqueados por sítios LoxP, permitindo a remoção de marcadores de seleção através da recombinase Cre (Cre Vector: sc-418923) após o estabelecimento de linhas celulares knockout estáveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:Rab 34 Anticorpo (C-5): sc-376710
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
Rab 34 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) | sc-406606 | 20 µg | $397.00 |
Visão geral
O RAB34 codifica a Rab 34, uma pequena GTPase da família Rab que regula o tráfego intracelular de membranas, com funções descritas na dinâmica do Golgi e de endossomos, no posicionamento de lisossomos e na maturação de fagossomos. Ao alternar entre os estados ligados a GTP e a GDP, a Rab 34 ajuda a coordenar o transporte vesicular, a ancoragem de organelos e a triagem de cargas, influenciando a renovação de recetores e as saídas de sinalização. A desregulação do tráfego mediado por Rab pode perturbar a função do eixo autofagia–lisossomo e a homeostase de membranas, processos frequentemente investigados em estudos sobre comportamento de células cancerígenas, neurodegeneração e interações hospedeiro–patógeno. Assim, o RAB34 é um ponto útil para dissecar vias de transporte vesicular e o seu impacto na fisiologia celular.
O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO Rab 34 (h) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene RAB34 em linhas celulares human. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do RAB34, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.
O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do RAB34 na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína Rab 34.
Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de RAB34 para a investigação da sinalização de Rab 34, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.
Características principais
- sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) RAB34 críticos para a função Rab 34
Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
Repórter GFP para identificação de células transfectadas
Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos RAB34 para melhorar a eficiência do knockout
Compatível com administração por transfecção
Variantes de Design
CRISPRs +/- HDRs
- Os gRNAs codificados pelo Rab 34 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) e pelo Rab 34 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h2) têm como alvo locais distintos dentro do locus RAB34. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
As construções doadoras HDR codificadas pelo Rab 34 Plasmídeo HDR (h) e o Plasmídeo HDR Rab 34 (h2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia RAB34 para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo RAB34 definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.