Rab 25 CRISPR/Cas9 케이오 플라스미드 (m): sc-424753

개요

Rab25는 막 수송을 조절하는 Rab11 아과에 속하는 소형 GTPase인 Rab25를 암호화하며, 상피세포에서 수용체와 인테그린의 엔도사이토시스 재활용(endocytic recycling) 및 극성화된 수송(polarized transport)을 포함한 막 트래픽킹을 조절한다. Rab25는 소포의 출아(budding), 결박(tethering), 융합(fusion)을 통제함으로써 세포 극성, 이동, 그리고 PI3K–AKT 경로나 성장인자 수용체 재활용과 같은 경로에 연결되는 표면 수용체로부터의 신호 출력에 영향을 준다. RAB25 활성의 조절 이상은 여러 조직에서 상피 항상성 변화 및 종양 관련 표현형과 연관되어 왔으며, 침윤, 전이와 연관된 트래픽킹 프로그램, 그리고 맥락 의존적인 종양유전자적 또는 종양억제적 기능을 연구하는 데 중요하다. 마우스 모델에서 Rab25의 교란은 발생 및 질병 관련 세포 행동에서 소포 수송 네트워크의 기전을 규명하는 연구를 가능하게 한다.

Rab 25 CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (m)는 mouse 세포주에서 Rab25 유전자의 표적 파괴를 위해 설계된 플라스미드 풀입니다. 각 플라스미드는 Rab25 유전자 내의 서로 다른 부위를 표적으로 하는 고유한 단일 가이드 RNA(sgRNA)와 Streptococcus pyogenes Cas9 뉴클레아제를 함께 발현합니다. 또한 이 플라스미드들은 GFP를 암호화하여, 형광 현미경이나 유세포 분석기를 통해 성공적으로 형질전환된 세포를 형광으로 식별하고 농축할 수 있게 합니다.

다중 가이드 설계는 Cas9에 의한 이중 가닥 절단 형성 후 Rab25의 개방 독서 틀(ORF)을 파괴하는 삽입 또는 결실(indel)이 발생할 가능성을 높입니다. CRISPR/Cas9 시스템에 의해 유발된 DNA 절단은 내인성 비동종 말단 결합(NHEJ) 경로를 통해 복구되며, 이는 종종 Rab 25 단백질 발현을 소멸시키는 프레임 시프트 돌연변이를 초래합니다.

이 CRISPR 녹아웃 시스템은 Rab 25 신호 전달 연구, 기능 유전체학 연구, 암 생물학 연구 및 인간 세포주에서의 치료 반응 평가를 위한 Rab25 결핍 세포 모델을 효율적으로 생성할 수 있게 합니다.

주요 특징

• Rab 25 기능에 중요한 Rab25 엑손을 표적하는 sgRNA
  전달을 단순화하기 위해 단일 플라스미드에서 SpCas9 및 sgRNA의 공동 발현
  형질전환된 세포 식별을 위한 GFP 리포터
  녹아웃 효율 향상을 위해 여러 Rab25 게놈 부위를 표적하는 플라스미드 풀
  형질전환을 통한 전달과 호환

설계 변형

CRISPRs +/- HDR

• Rab 25 CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (m) 및 Rab 25 CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (m2)에 의해 암호화되는 gRNA는 Rab25 유전자좌 내의 서로 다른 부위를 표적화합니다. 표적화 설계 중 하나 또는 둘 다 이용 가능할 수 있습니다. 구입 가능 여부는 관련 제품을 참조하십시오.
  Rab 25 HDR 플라스미드 (m) 및 Rab 25 HDR 플라스미드 (m2)에 의해 암호화되는
  HDR 기증자 컨스트럭트는 푸로마이신 내성 카세트와 RFP 리포터를 포함하며, 이는 CRISPR/Cas9 KO 설계에 해당하는 정의된 Rab25 표적 부위에서의 상동성 유도 복구를 지원하기 위해 Rab25 상동성 암으로 둘러싸여 있습니다. HDR 기증자의 재고 여부는 달라질 수 있습니다. 재고 여부는 관련 제품을 참조하십시오.

연구용으로만 사용하세요. 진단 또는 치료용이 아닙니다.