PSS1 Lentiviral Activation Particles (m): sc-422474-LAC

Das murine Gen **Ptdss1** kodiert die **Phosphatidylserin-Synthase 1 (PSS1)**, ein membrangebundenes Enzym des endoplasmatischen Retikulums, das Basenaustauschreaktionen katalysiert, um aus **Phosphatidylcholin** **Phosphatidylserin** zu erzeugen. Durch die Kontrolle der Verfügbarkeit von Phosphatidylserin beeinflusst PSS1 die Membranbiogenese, Lipidasymmetrie und Signalübertragung und unterstützt zudem die nachgeschaltete **Phosphatidylethanolamin**-Synthese über die mitochondriale Decarboxylierung. Dieser Lipid-Knotenpunkt überschneidet sich mit Signalwegen, die den Vesikeltransport, apoptoseassoziierte Membranumbauprozesse und immunologisch relevante „Eat-me“-Signale regulieren. Eine veränderte Phosphatidylserin-Metabolisierung wurde mit neuroentwicklungsbezogenen Phänotypen und allgemeineren Störungen der Membranhomöostase in Verbindung gebracht, was **Ptdss1** zu einem nützlichen Ziel für mechanistische Studien der lipidgetriebenen Zellphysiologie macht.

PSS1 Lentivirale Aktivierungspartikel (m) erfüllen diesen Bedarf, indem sie das vollständige Transkriptionsaktivierungssystem des Synergistic Activation Mediator (SAM) in transduktionsbereite, hoch-titrige lentivirale Partikel verpacken und so eine effiziente Ptdss1-Hochregulation über ein breiteres Spektrum menschlicher Zelltypen ermöglichen.

PSS1 Lentivirale Aktivierungspartikel (m) liefern alle funktionellen Komponenten des Synergistic Activation Mediator (SAM)-Systems über lentivirale Transduktion. Das System umfasst drei Partikelpräparate, die gemeinsam in Zielzellen transduziert werden: eines, das für katalytisch inaktives dCas9 (Mutationen D10A und N863A) kodiert, das mit der VP64-Transaktivierungsdomäne und einem Blasticidin-Resistenzgen fusioniert ist; eines, das für das MS2-p65-HSF1-Fusionsprotein mit einem Hygromycin-Resistenzgen kodiert; und eines, das für eine zielspezifische 20-nt-sgRNA kodiert, die an zwei MS2-RNA-Aptamere mit einem Puromycin-Resistenzgen fusioniert ist. Nach der lentiviralen Transduktion und der genomischen Integration der Expressionskassetten werden die SAM-Komponenten stabil exprimiert und lagern sich am Zielort innerhalb der proximalen Promotorregion stromaufwärts der Ptdss1-Transkriptionsstartstelle an, wo VP64, p65 und HSF1 kooperativ wirken, um endogene Transkriptionsmaschinerie zu rekrutieren und eine anhaltende Hochregulation der endogenen PSS1-Expression zu bewirken. Die Verwendung von nuklease-inaktivem dCas9 verhindert die Einführung von Doppelstrangbrüchen in der DNA und bewahrt den nativen Ptdss1-Genomlokus sowie die regulatorische Architektur.

Das lentivirale Format bietet mehrere praktische Vorteile: Die stabile genomische Integration unterstützt eine vererbbare Aktivierung über Zellteilungen hinweg; Partikelpräparate mit hohem Titer machen eine eigene Virusproduktion überflüssig; und die Kompatibilität mit primären, sich nicht teilenden und transfektionsresistenten Zelltypen erweitert die experimentellen Möglichkeiten. Eine erfolgreiche Transduktion kann durch eine dreifache Antibiotika-Selektion mit Puromycin, Hygromycin und Blasticidin bestätigt und verstärkt werden.

Nur für Forschungszwecke. Nicht für diagnostische oder therapeutische Zwecke bestimmt.