PPARγ Lentiviral Activation Particles (m): sc-422363-LAC

Das murine Gen *Pparg* kodiert den Peroxisomen-Proliferator-aktivierten Rezeptor Gamma (PPARγ), einen ligandenaktivierten nukleären Rezeptor, der als Transkriptionsfaktor die Adipozytendifferenzierung, die Lipidspeicherung und den insulinsensitiven Glukosestoffwechsel steuert. PPARγ bildet Heterodimere mit RXR und bindet an PPAR-Response-Elemente, um Genprogramme zu koordinieren, die an der Aufnahme von Fettsäuren, der Triglyceridsynthese und der Adipokin-Signalübertragung beteiligt sind. Dieser Regulator integriert Nährstoff- und Entzündungssignale und verknüpft die metabolische Homöostase mit der Immunmodulation durch Crosstalk mit Signalwegen wie NF-κB und MAPK. Eine fehlregulierte *Pparg*-Aktivität wird breit in Zusammenhang mit adipositasassoziierter metabolischer Dysfunktion, Fettleber-Phänotypen, Makrophagenpolarisierung und fibrosebedingtem Remodeling in mehreren Geweben untersucht.

PPARγ Lentivirale Aktivierungspartikel (m) erfüllen diesen Bedarf, indem sie das vollständige Transkriptionsaktivierungssystem des Synergistic Activation Mediator (SAM) in transduktionsbereite, hoch-titrige lentivirale Partikel verpacken und so eine effiziente Pparg-Hochregulation über ein breiteres Spektrum menschlicher Zelltypen ermöglichen.

PPARγ Lentivirale Aktivierungspartikel (m) liefern alle funktionellen Komponenten des Synergistic Activation Mediator (SAM)-Systems über lentivirale Transduktion. Das System umfasst drei Partikelpräparate, die gemeinsam in Zielzellen transduziert werden: eines, das für katalytisch inaktives dCas9 (Mutationen D10A und N863A) kodiert, das mit der VP64-Transaktivierungsdomäne und einem Blasticidin-Resistenzgen fusioniert ist; eines, das für das MS2-p65-HSF1-Fusionsprotein mit einem Hygromycin-Resistenzgen kodiert; und eines, das für eine zielspezifische 20-nt-sgRNA kodiert, die an zwei MS2-RNA-Aptamere mit einem Puromycin-Resistenzgen fusioniert ist. Nach der lentiviralen Transduktion und der genomischen Integration der Expressionskassetten werden die SAM-Komponenten stabil exprimiert und lagern sich am Zielort innerhalb der proximalen Promotorregion stromaufwärts der Pparg-Transkriptionsstartstelle an, wo VP64, p65 und HSF1 kooperativ wirken, um endogene Transkriptionsmaschinerie zu rekrutieren und eine anhaltende Hochregulation der endogenen PPARγ-Expression zu bewirken. Die Verwendung von nuklease-inaktivem dCas9 verhindert die Einführung von Doppelstrangbrüchen in der DNA und bewahrt den nativen Pparg-Genomlokus sowie die regulatorische Architektur.

Das lentivirale Format bietet mehrere praktische Vorteile: Die stabile genomische Integration unterstützt eine vererbbare Aktivierung über Zellteilungen hinweg; Partikelpräparate mit hohem Titer machen eine eigene Virusproduktion überflüssig; und die Kompatibilität mit primären, sich nicht teilenden und transfektionsresistenten Zelltypen erweitert die experimentellen Möglichkeiten. Eine erfolgreiche Transduktion kann durch eine dreifache Antibiotika-Selektion mit Puromycin, Hygromycin und Blasticidin bestätigt und verstärkt werden.

Nur für Forschungszwecke. Nicht für diagnostische oder therapeutische Zwecke bestimmt.