PGAM1 CRISPR/Cas9 케이오 플라스미드 (h): sc-404283

개요

포스포글리세레이트 무타아제 1(PGAM1)은 세포질에 존재하는 해당과정 효소로, 3-포스포글리세르산과 2-포스포글리세르산의 상호 전환을 촉매하여 해당과정의 플럭스와 하류 생합성 중간체의 균형을 조절합니다. 중심 탄소 대사의 핵심 분기점에 위치한 PGAM1은 ATP 생성에 기여하고, 뉴클레오타이드 및 아미노산 합성과 연계된 동화(합성) 경로에 필요한 전구체를 제공합니다. PGAM1 활성의 변화는 대사 재프로그래밍과 증식성 표현형과 연관되어 있어, 종양 대사와 세포 성장 조절 연구에서 중요하게 다뤄집니다. 또한 PGAM1은 해당과정, 산화환원 항상성, 스트레스 적응 신호전달 간의 연계를 탐구하기 위한 분석 노드로도 활용됩니다.

PGAM1 CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (h)는 human 세포주에서 PGAM1 유전자의 표적 파괴를 위해 설계된 플라스미드 풀입니다. 각 플라스미드는 PGAM1 유전자 내의 서로 다른 부위를 표적으로 하는 고유한 단일 가이드 RNA(sgRNA)와 Streptococcus pyogenes Cas9 뉴클레아제를 함께 발현합니다. 또한 이 플라스미드들은 GFP를 암호화하여, 형광 현미경이나 유세포 분석기를 통해 성공적으로 형질전환된 세포를 형광으로 식별하고 농축할 수 있게 합니다.

다중 가이드 설계는 Cas9에 의한 이중 가닥 절단 형성 후 PGAM1의 개방 독서 틀(ORF)을 파괴하는 삽입 또는 결실(indel)이 발생할 가능성을 높입니다. CRISPR/Cas9 시스템에 의해 유발된 DNA 절단은 내인성 비동종 말단 결합(NHEJ) 경로를 통해 복구되며, 이는 종종 PGAM1 단백질 발현을 소멸시키는 프레임 시프트 돌연변이를 초래합니다.

이 CRISPR 녹아웃 시스템은 PGAM1 신호 전달 연구, 기능 유전체학 연구, 암 생물학 연구 및 인간 세포주에서의 치료 반응 평가를 위한 PGAM1 결핍 세포 모델을 효율적으로 생성할 수 있게 합니다.

주요 특징

• PGAM1 기능에 중요한 PGAM1 엑손을 표적하는 sgRNA
  전달을 단순화하기 위해 단일 플라스미드에서 SpCas9 및 sgRNA의 공동 발현
  형질전환된 세포 식별을 위한 GFP 리포터
  녹아웃 효율 향상을 위해 여러 PGAM1 게놈 부위를 표적하는 플라스미드 풀
  형질전환을 통한 전달과 호환

설계 변형

CRISPRs +/- HDR

• PGAM1 CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (h) 및 PGAM1 CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (h2)에 의해 암호화되는 gRNA는 PGAM1 유전자좌 내의 서로 다른 부위를 표적화합니다. 표적화 설계 중 하나 또는 둘 다 이용 가능할 수 있습니다. 구입 가능 여부는 관련 제품을 참조하십시오.
  PGAM1 HDR 플라스미드 (h) 및 PGAM1 HDR 플라스미드 (h2)에 의해 암호화되는
  HDR 기증자 컨스트럭트는 푸로마이신 내성 카세트와 RFP 리포터를 포함하며, 이는 CRISPR/Cas9 KO 설계에 해당하는 정의된 PGAM1 표적 부위에서의 상동성 유도 복구를 지원하기 위해 PGAM1 상동성 암으로 둘러싸여 있습니다. HDR 기증자의 재고 여부는 달라질 수 있습니다. 재고 여부는 관련 제품을 참조하십시오.

연구용으로만 사용하세요. 진단 또는 치료용이 아닙니다.