Per1 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h): sc-401260
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- Per1 O Plasmídeo CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (h) é um conjunto de plasmídeos, cada um codificando a nuclease Cas9 e um RNA guia (gRNA) de 20 nt específico para o alvo, concebido para uma eficiência máxima de knockout utilizando sequências derivadas da biblioteca GeCKO v2
- As sequências de gRNA direcionam a Cas9 para induzir quebras de cadeia dupla (DSBs) específicas do local no locus genómico Per1, resultando no knockout do gene através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ)
- Os genes de resistência à puromicina e RFP são flanqueados por sítios LoxP, permitindo a remoção de marcadores de seleção através da recombinase Cre (Cre Vector: sc-418923) após o estabelecimento de linhas celulares knockout estáveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:Per1 Anticorpo (E-8): sc-398890
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
Per1 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) | sc-401260 | 20 µg | $397.00 |
Visão geral
PER1 codifica a proteína Period 1, um componente central do relógio circadiano molecular que participa em circuitos de retroalimentação transcrição–tradução que controlam a expressão gênica rítmica ao longo de 24 horas. PER1 interage com outros reguladores do relógio para modular a transcrição dirigida por CLOCK/ARNTL (BMAL1), conectando a marcação do tempo circadiano ao controle do ciclo celular, às respostas a danos no DNA, ao metabolismo e à sinalização hormonal. Por meio dessas redes, PER1 influencia a coordenação temporal de vias celulares de estresse e a homeostase mitocondrial e redox. A desregulação da expressão ou da ritmicidade de PER1 tem sido associada a alterações na fisiologia do ciclo sono–vigília e foi relatada em estudos sobre biologia do câncer, distúrbios metabólicos e mecanismos de doenças neuropsiquiátricas.
O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO Per1 (h) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene PER1 em linhas celulares human. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do PER1, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.
O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do PER1 na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína Per1.
Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de PER1 para a investigação da sinalização de Per1, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.
Características principais
- sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) PER1 críticos para a função Per1
Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
Repórter GFP para identificação de células transfectadas
Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos PER1 para melhorar a eficiência do knockout
Compatível com administração por transfecção
Variantes de Design
CRISPRs +/- HDRs
- Os gRNAs codificados pelo Per1 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) e pelo Per1 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h2) têm como alvo locais distintos dentro do locus PER1. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
As construções doadoras HDR codificadas pelo Per1 Plasmídeo HDR (h) e o Plasmídeo HDR Per1 (h2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia PER1 para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo PER1 definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.